【摘 要】
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该研究以转基因抗除草剂大豆及其加工产品为材料,以图建立经济灵敏、准确可靠的转基因大豆及其产品的外源基因检测体系.该研究取得了以下主要结果:1.对大豆及其粗加工和深加
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该研究以转基因抗除草剂大豆及其加工产品为材料,以图建立经济灵敏、准确可靠的转基因大豆及其产品的外源基因检测体系.该研究取得了以下主要结果:1.对大豆及其粗加工和深加工产品的不同DNA抽提及纯化方法进行了比较和研究,确定了以改良的SDS法为基础,对不同性质的材料稍加改变的DNA抽提方法,得到了较好的效果.在DNA的进一步纯化方面,确立了以改良的异硫氰酸胍-硅胶柱纯化法作为DNA纯化的基本方法.2.设计合成检测大豆内参照基因Lectin及转基因抗除草剂Roundup Ready大豆外源基因.该研究还应用了巢式PCR检测了从豆油、咖啡伴侣中抽提的DNA,证明可以检测得到预期目的片段,并经测序证实该扩增片段序列的正确.该研究建立的常规PCR方法检测的相对灵敏度可达到0.1%,绝对灵敏度为80拷贝DNA初始模板.3.该研究采用多重PCR同时检测了多个基因.4.对大豆及其产品的定量PCR检测技术的研究,采用了两种实时荧光定量方法:SYBR Green I染料法及TaqMan探针法.5.该论文在上述系列研究基础上,探讨了从基因水平上建立转基因检测体系的策略.
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