目的:探讨内源性神经营养因子（Endogenous neurotrophic factors,ENTFs）对冷冻保存大鼠坐骨神经同种异体移植后神经再生的影响。方法:15 mm雌性Sprague-Dawley大鼠坐骨神经置于DMEM溶液中,37℃、5%CO₂分别体外预处理1天、3天、7天、14天和21天（A、B、C、D、E组）,设置新鲜神经组（F组）,Western Blot检测神经的胶质细胞源性神经营养因子（Glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF）、神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）、Bcl-2、Bax、Caspase-3、主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex,MHC）-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达。将上述预处理不同时间的坐骨神经和新鲜坐骨神经置于冷冻保存液中液氮保存4周,钙黄绿素/碘化丙啶（Calcein-acetoxymethyl/Propidium iodide,Calcein-AM/PI）荧光染色、激光共聚焦显微镜观察神经活细胞和死细胞情况。取上述冷冻保存4周的预处理不同时间的坐骨神经、冷冻保存4周的新鲜坐骨神经和新鲜坐骨神经（G组）,37℃、5%CO₂恒温培养箱培养7天,Western Blot检测GDNF、NGF蛋白表达。用上述冷冻保存4周的预处理不同时间的坐骨神经、冷冻保存4周的新鲜坐骨神经和新鲜坐骨神经,同种异体移植修复对应雌性Wistar大鼠坐骨神经10mm缺损（A′、B′、C′、D′、E′、F′、G′组）,设置同系移植组（H′组）。同种异体移植术后1周,免疫荧光染色观察移植物CD8⁺T细胞、巨噬细胞入侵情况,ELISA检测受者血清白细胞介素（Interleukin,IL）-2、干扰素（Interferon,IFN）-γ、肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor,TNF）-α水平。同种异体移植术后20周,电生理检测移植侧肌肉复合动作电位（Compound muscle action potential,CMAP）和神经传导速度（Nerve conduction velocity,NCV）,称重计算腓肠肌湿重比,应用荧光显微镜（NF200免疫荧光染色）、光学显微镜（甲苯胺蓝染色）和透射电镜评价再生神经组织学情况。结果:预处理不同时间的坐骨神经,GDNF、NGF蛋白表达,C、D、E组均高于F组（P<0.05）;Bcl-2蛋白表达,B、C、D、E组低于F组（P<0.05）;Bax、Caspase-3蛋白表达,B、C、D、E组均高于F组（P<0.05）;MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ蛋白表达,A、B、C、D、E组均低于F组（P<0.05）。预处理不同时间的坐骨神经和新鲜坐骨神经冷冻保存4周后,与F、G组相比,C、D、E组活细胞数量降低。冷冻保存4周的预处理不同时间的坐骨神经、冷冻保存4周的新鲜坐骨神经和新鲜坐骨神经体外培养7天,与G组相比,A、B、C、D、E、F组GDNF蛋白表达降低（P<0.05）,A、B、C、E、F组NGF蛋白表达降低（P<0.05）,但D组NGF蛋白表达与G组比较差异无统计学意义（P>0.05）;与F组相比,D、E组GDNF蛋白表达增加（P<0.05）,A、B、C、D组NGF蛋白表达增加（P<0.05）。同种异体移植术后1周,移植物CD8⁺T细胞、巨噬细胞入侵情况:与F′、G′组相比,C′、D′、E′组CD8⁺T细胞、巨噬细胞较少。同种异体移植术后1周,受者血清IL-2、IFN-γ、TNF-α水平:与F′、G′组相比,C′、D′、E′组血清IL-2、TNF-α水平降低（P<0.05）,E′组血清IFN-γ水平降低（P<0.05）。移植术后20周,C′、D′、E′组CMAP、NCV、腓肠肌湿重比、再生有髓神经纤维数及髓鞘厚度均显著优于F′、G′组（P<0.05）,C′、D′、E′组移植神经NF200荧光强度也优于F′、G′组。结论:体外预处理大鼠坐骨神经能诱导ENTFs表达。高表达ENTFs的坐骨神经冷冻保存后,虽然存活SCs数量减少,但体外具有继续高表达ENTFs的能力,且同种异体移植后免疫排斥反应较弱,能促进移植后受者神经再生和功能恢复。