CACNA1C基因的单核苷酸多态性(SNP)与左旋氨氯地平片降压效果的相关性研究以及SNP检测平台的建立

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目的:探讨CACNA1C(rs2239128、rs2239050、rs2238032)单核苷酸多态性与左旋氨氯地平片临床降压效果的相关性,建立便捷可行的SNP检测平台。方法:2018年6月至2018年12月共纳入符合条件的轻、中度原发性高血压(收缩压140-179mmHg和/或舒张压90-109mmHg)患者89例,所有原发性高血压患者的诊断均符合《中国高血压防治指南2018年修订版》,均签署知情同意书。纳入的原发性高血压患者进行2周的药物洗脱期后进行苯磺酸左旋氨氯地平片2.5mg/片/QD(商品名:施慧达)单药治疗4周,期间不应用其他影响血压的药物。收集基础血压值、治疗4周后血压值、身高、体重、吸烟史、饮酒史、糖尿病史等相关的临床资料,测定肝肾功能相关指标、脂类相关指标等。依据《心血管系统药物临床研究指导原则》评价降压疗效。治疗前空腹采取静脉血2ml于EDTA抗凝管中,提取基因组DNA。利用实时荧光定量PCR(qPCR)方法对目的基因的SNP进行基因分型,并对研究位点进行DNA测序加以验证。分析各位点不同基因型与左旋氨氯地平片降压效果的相关性,分析对比qPCR检测结果与基因测序结果,初步建立SNP检测平台。采用SPSS22.0软件包进行数据分析。结果:1.与治疗前相比,所有接受左旋氨氯地平治疗后的各基因型患者收缩压和舒张压均有下降。2.左旋氨氯地平片单药治疗4周后,89例轻、中度原发性高血压患者中有效组60例(67.42%),无效组29例(32.58%),整体有效率为67.42%。有效组和无效组收缩压降幅和舒张压降幅分别为(ΔSBP 23.37±11.57mmHg,13.48±6.22mmHg;ΔDBP 12.75±7.51mmHg,5.52±2.42 mmHg),p<0.01。两组间性别、年龄、心率、吸烟史、饮酒史、BMI、糖尿病史、空腹血糖、TG、TC、基线收缩压、基线舒张压等一般临床资料及生化指标均无明显差异。3.应用多元线性回归方法调整混杂因素(年龄、吸烟史、饮酒史、BMI、空腹血糖、TG、LDL-C、基线SBP、基线DBP)后,CACNA1C rs2239128C>T CC基因型与T等位基因携带者(CT/TT)收缩压降幅ΔSBP分别为22±10.56mmHg,18.94±11.41mmHg,差异无统计学意义(β=-1.992,p=0.426),舒张压降幅ΔDBP分别为13.94±8.03mmHg,7.93±5.50mmHg,差异具有统计学意义(β=-6.844,p<0.001);rs2239050G>C GG基因型与C等位基因携带者(GC/CC)收缩压降幅ΔSBP分别为21.46±11.86mmHg,16.96±8.48mmHg,差异具有统计学意义(β=-5.572,p=0.039),舒张压降幅ΔDBP分别为11.25±7.48mmHg,7.96±5.99mmHg,差异具有统计学意义(β=-3.432,p=0.046);rs2238032T>G TT基因型与G等位基因携带者(TG/GG)收缩压降幅ΔSBP分别为21.15±11.76mmHg,16.90±8.16mmHg,差异具有统计学意义(β=-6.105,p=0.037),舒张压降幅ΔDBP分别为10.43±7.33mmHg,9.86±6.93mmHg,差异具有统计学意义(β=-3.263,p=0.048)。4.60例有效组中发生3种SNP突变的0例,发生2种SNP突变的6例(10%),发生1种SNP突变的37例(61.67%),无突变的17例(28.33%);29例无效组中发生3种SNP突变的2例(6.90%),发生2种SNP突变的20例(68.97%),发生1种SNP突变的7例(24.13%),无突变的0例。有效组中2种以上SNP突变者6例(10%),无效组中2种以上SNP突变者22例(75.87%),无效组中发生2种及以上SNP突变的患者显著高于有效组,二者差异有统计学意义(p<0.01)。5.应用实时荧光定量(qPCR)方法对SNP基因型进行检测,其结果与测序结果完全吻合,初步建立了SNP检测平台。结论:1.左旋氨氯地平对于轻、中度原发性高血压患者的有效率为67.42%。2.CACNA1C基因的SNP位点与左旋氨氯地平临床降压效果相关。CACNA1C rs2239128C>T CC基因型对左旋氨氯地平的降压效果优于T等位基因携带者;rs2239050G>C GG基因型对左旋氨氯地平的降压效果优于C等位基因携带者;rs2238032T>G TT基因型对左旋氨氯地平的降压效果优于G等位基因携带者。3.SNP突变位点检测可用于指导临床降压药物的使用。4.本实验中建立的qPCR检测平台可用于SNP突变位点的检测。
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