研究背景和目的:喘息是婴幼儿呼吸系统疾病中极为常见的症状，它可以出现在由病毒、细菌、支原体等多种病原体引起的呼吸道感染中，也可能是婴幼儿哮喘的早期临床表现。有研究表明，婴幼儿出现首次喘息，日后有相当程度的病例发展为哮喘。但目前，仍有许多早期喘息患儿不被重视，一些评分不足的婴幼儿哮喘患者被漏诊，因此错过了哮喘的早期干预时间，最终发展为反复发生的难治性哮喘。因此，深入探讨婴幼儿喘息和哮喘在发病机制上的相关性，当婴幼儿首次发作喘息，给予正确评价和判断，并采用有效的方法及早干预和治疗，对减少将来的哮喘发生率，具有重要的临床意义。 当今Th1/Th2亚群的表达和失调已处于对哮喘发病机制研究的中心地位。IFN-γ和IL-4作为Th1和Th2细胞因子代表，它们在哮喘发病中的正负作用已引起许多研究者的关注。IL-4在哮喘炎症过程中被认为是起主导作用的因子，它诱导IgE产生及嗜酸性粒细胞向气管内聚集，导致气道的慢性持续性炎症。IFN-γ则被认为是一种抗支气管哮喘因子。研究表明，哮喘患者外周血单个核细胞(PBMC)中IL-4表达增多，IFN-γ表达下降，Th1/Th2之间的平衡呈Th2方向的偏移状态。 而在对小儿喘息性疾病的研究中，也发现了其中T细胞免疫调节紊乱的现象。研究表明毛支患儿血清IL-4和IgE水平明显高于健康儿童，反复喘息的毛支患儿血清IL-4和IgE水平更高，并伴有IFN-γ水平的降低，提示毛支和反复喘息的毛支患儿存在不同程度的Th2细胞因子及IgE生成增多，与哮喘的Th2细胞因子优势表达有相似性。还有对喘息样支气管炎患儿免疫功能变化的研究发现，喘支患儿Th1细胞受到抑制，IFN-γ分泌减少，对IL-4的拮抗作用降低，可致B细胞合成IgE和IgG4增加，参与气道的炎症反应，导致临床上出现咳嗽、喘息，提示T细胞免疫调节紊乱以及Th1细胞活性降低在喘支的发生中起着一定的作用。 吸入糖皮质激素(InhalerCorticoseroid，ICS)是目前公认的安全、有效的治疗哮喘的方法，被全球哮喘防治创议(GINA)推荐为首选。ICS目前广泛地应用于临床喘息性疾病和哮喘的治疗。有研究表明哮喘患者吸入糖皮质激素后血清IL-4水平下调、IFN-γ浓度上升，认为ICS可能是通过抑制Th2类细胞因子的过度分泌，起调节Th亚群功能紊乱的作用。 目前国内外有许多对喘息性疾病和哮喘的细胞因子失衡的研究，但对首次发作喘息患儿的细胞免疫状态未见相关文献报道，对ICS应用于首次发作喘息患儿的适用性也研究较少。本研究的目的，旨在通过测量喘息首次发作及吸入激素后血清IL-4和IFN-γ水平，观察吸入糖皮质激素对IL-4/IFN-γ失衡的调节作用，为临床干预小儿喘息性疾病发展为哮喘寻找新途径。 对象和方法:1.研究对象选择2004年10月至2005年9月在本院门诊及住院出现第一次喘息的患儿共60例。60例均在首次就诊时取静脉血，分离血清测IL-4和IFN-γ的水平。另选择20例同期在本院门诊做健康体检的婴幼儿为健康对照组。健康对照组用同样方法检测血清IL-4和IFN-γ的水平。将60例喘息患儿按血清IL-4/IFN-γ水平的异常与否分为两类，得出IL-4/IFN-γ水平异常的病例共38例，IL-4/IFN-γ水平正常的病例共22例。将IL-4/IFN-γ水平正常的22例设为C组，将IL-4/IFN-γ水平异常的38例随机分为A、B两组，B、C组仅给予常规治疗，A组在常规治疗基础上，予以必可酮(丙酸倍氯米松，BDP)气雾剂吸入三个月。喘息患儿和健康儿童在性别构成、年龄分布上无显著性差异(p＞0.05)。 2.检测方法所有研究对象于首次就诊时采集静脉血5ml,其中2ml留待检测血钙、血磷，3ml分离血清，留存于-20℃以下待检。集齐标本后用双抗体夹心ELISA法检测血清IL-4、IFN-γ的浓度。严格按照试剂盒的操作说明操作，用酶标仪测得标准品和各标本OD450值，将测得的标准品的OD450值和浓度输入计算机作回归分析，以OD值为纵坐标和以标准品的浓度为横坐标绘制出标准曲线，根据标准曲线和标本的OD值计算出各标本的浓度。 3.统计处理采用SPSS12.0统计软件包进行统计分析。对非正态分布的原始实验数据经自然对数转换为正态分布的资料，按正态分布作相关统计分析。计量资料以均数±标准差(X±SD)表示。计量资料采用方差分析和独立样本t检验。计数资料采用X2检验。显著性水准α=0.05，双侧检验。 结果:1.四组儿童治疗前血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平的比较 应用方差分析对A、B、C组和健康对照组治疗前的血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ的水平作F检验，IL-4和IL-4/IFN-γ的水平四组比较有显著性差异(F=91.16、63.793，p＜0.05)。在四组之间作LSD检验，结果显示A组与B组无显著性差异(t=0.301、0.179，p＞0.05)，两组病例具有可比性；C组与健康对照组无显著性差异(t=0.480、0.378，p＞0.05)；A组显著高于健康对照组(t=11.166、9.945，p＜0.01)；B组显著高于健康对照组(t=11.646、9.976，p＜0.01)。而IFN-γ的水平四组比较无显著性差异(F=0.271，p＞0.05)。2.A、B、C三组儿童治疗后血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平的比较 应用方差分析对A、B、C三组治疗后的血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ的水平作F检验，IL-4和IL-4/IFN-γ的水平三组比较有显著性差异(F=27.089、22.509，p＜0.05)。在三组之间作LSD检验，结果显示A组显著低于B组(t=3.383、3.651，p＜0.01)；B组显著高于C组(t=7.361、6.718，p＜0.01)；A组显著高于C组(t=3.393、2.936，p＜0.05)。而IFN-γ的水平三组比较无显著性差异(F=1.937，p＞0.05)。3.A、B、C组治疗前后血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平的比较 应用独立样本t检验分别对A、B、C组治疗前后血清IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ的水平作分析，A组IL-4和IL-4/IFN-γ水平治疗后显著低于治疗前(t=4.869、4.376,p＜0.05)；IFN-γ水平治疗前后比较无显著性差异(t=0.293,p＞0.05)。B、C组IL-4、IFN-γ和IL-4/IFN-γ水平治疗前后比较均无显著性差异(p＞0.05)。 4.A、B、C三组3个月内反复喘息发作的观察比较 对A、B、C三组患儿在实验的3个月内进行病情随访追踪，观察各组反复喘息发作的人数，A组患儿喘息发作≥3次的比率明显低于B组，经检验有显著性差异(X2=4.88，p＜0.05)；A、C两组患儿喘息发作≥3次的比率相当，经检验无显著性差异(X2=0.03，p＞0.05)。 5.四组儿童治疗前后血钙、血磷及身高、体重的比较 应用方差分析对四组儿童治疗前后血钙、血磷及身高、体重作F检验，治疗前后四项指标比较无显著性差异(F=1.068、2.373，p＞0.05)。 结论:1.部分首次发作喘息的患儿血清IL-4水平明显升高，存在IL-4/IFN-γ的失衡状态，呈Th2优势表达。 2.吸入糖皮质激素能降低喘息患儿血清IL-4水平，对其Th1/Th2类细胞因子的失衡状态起到调节作用。 3.吸入糖皮质激素能有效减少反复喘息发作的次数，对预防哮喘的发生、发展有积极作用。 4.吸入糖皮质激素3个月后未能使血清IL-4水平降到正常，可能说明3个月的疗程仍偏短。 5.吸入糖皮质激素对婴幼儿的血钙、血磷及身高、体重等指标没有产生影响，说明短期吸入糖皮质激素对婴幼儿的生长发育没有副作用。