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急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)是指冠状动脉血供急剧减少或中断,使相应的心肌严重而持久的缺血而导致心肌坏死。该病起病急、病死率高。早期诊断是关键。因此心肌标志物的检测对AMI早期诊断有至关重要的意义。CK-MB对AMI诊断具有较高的敏感性,可以对溶栓治疗的评估。此外,CK-MB还能评估心肌梗死范围及再梗死等。快速、高敏感、定量检测CK-MB,POCT是很好的选择。目的:以包埋铕螯合物的羧基修饰化微球(CM-EUs)为标记物,以血清CK-MB为靶蛋白,建立一个时间分辨荧光免疫层析试纸条的检测系统来对临床CK-MB血清进行定量检测,该方法具有快速、简单、高灵敏度、高特异性、可靠性强及重复性好的特征。方法:采用双抗体夹心反应模式,在试纸条样品垫滴加50ul CK-MB血清,根据渗透与虹吸作用,使微球标记的CK-MB单抗与抗原结合的复合物在NC膜检测线被捕获,微球标记兔IgG在质控线被捕获,12min后,通过时间分辨荧光免疫层析检测仪,通过检测荧光的相对峰值高度(Absolute peak height-baseline),取T线相对峰值高度(Absolute peak height-baseline)记为HT;同样C线相对峰值高度记为Hc,记录HT/Hc的比值。我们选择HT/Hc比值为基础定量检测血清CK-MB的浓度。结果:试纸条的线性范围是0.85-100.29 ng/mL,分析灵敏度是0.029ng/mL。批内精密度变异系数CV<10%,批间精密度和天间精密度的变异系数CV均<15%。回收率在90.17-112.63%之间。CK-BB、CK-MM、心肌肌钙蛋白I、肌红蛋白、甘油三脂、胆红素及血红蛋白、类风湿因子等对试纸条检测的交叉反应率<0.5%。120份临床样本的检测,结果显示试纸条和梅里埃mini VIDAS的检测方法的比较具有显著相关,相关系数r=0.9794,P<0.001。结论:该时间分辨荧光免疫层析试纸条是一个快速、简单、价钱不高、高灵敏度、高特异性、可靠性强、抗干扰性好及重复性高的检测系统,在POCT领域具有很大的发展前景。