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Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)是一类重要的模式识别受体(PRRs),通过识别病原微生物特定的病原体相关分子模式(Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)启动天然免疫应答。Toll蛋白最早发现在调控果蝇的胚胎发育过程中起重要作用。目前,在哺乳动物细胞中相继发现并克隆了11种TLR分子。它们通过选择性识别病原体中特定的分子结构,活化机体免疫细胞,以抵抗病原菌的入侵。然而,TLRs的过度活化反而产生有害的结果,可导致各种炎症性疾病和自身免疫病,如内毒素休克和类风湿性关节炎。因此,TLRs的活化及其信号途径必需受到严密的调控。 Rab7定位于溶酶体,调控蛋白从早期内体到晚期内体或晚期内体到溶酶体的转运。近年来的研究表明,Rab7参与多种受体的转运及信号转导过程。Rab7b是我们自主克隆到的一个新的小G蛋白,与Rab7高度同源,也定位于溶酶体,特异性地表达在单核细胞系。TLRs主要分布在单核细胞如巨噬细胞和树突状细胞。我们设想Rab7b可能参与TLRs的信号转导。在本课题中,我们研究了小G蛋白mRab7b在巨噬细胞TLRs信号转导中的调控作用。 一、小G蛋白Rab7b的小鼠同源物mRab7b的鉴定和序列分析 Rab7b是通过大规模测序从人树突状细胞中发现的一个新的小G蛋白(GenBank登陆号为AY094596)。Rab7b的cDNA包含一个600bp的开放读码框(178-777bp),编码一个由199个氨基酸组成的蛋白质。在本实验中,我们搜索到一个登陆号为NM-145509的克隆。该基因与Rab7b相似性达92%,同样编码一个199个氨基酸的蛋白质,我们推测其可能是Rab7b的小鼠同源物,命名为