论文部分内容阅读
建立稳定、高效的苦瓜不定器官再生体系是苦瓜转基因成功的关键环节。本研究分别以‘翠妃’、‘翠秀’的子叶作为外植体,比较系统地研究了子叶离体培养的技术体系,初步探讨了子叶苗龄、子叶的部位、基本培养基、不同的植物生长调节剂、暗培养、硝酸银浓度等对苦瓜子叶不定芽诱导的影响。其试验结果表明: （1） 子叶苗龄:不同苗龄的子叶不定芽再生率的差异很大,本试验表明,‘翠妃’、‘翠秀’均以9d左右的苗龄培养效果最好。 （2） 子叶部位:子叶不同部位不定芽的再生率差异显著,本试验研究表明,‘翠妃’、‘翠秀’都是在子叶基端外植体临近下胚轴的部位诱导效果最好。 （3） 在本试验所用的32个植物生长调节剂组合处理中,‘翠妃’表现出较好的再生力,‘翠秀’则次之。通过比较不定芽再生率及平均每叶芽数两个指标,两个品种的最适不定芽诱导培养基和再生率分别是: ‘翠妃’:MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,不定芽诱导率为54.21% ‘翠秀’:MS+BA1.0mg/L+NAA0.2mg/L,不定芽诱导率为19.45% （4） BA、KT两种细胞分裂素在苦瓜子叶不定芽再生上的诱导结果表明,BA的诱导效果优于KT。 （5） NAA、IAA、IBA、2,4-D四种生长素对苦瓜不定芽再生的诱导结果表明,对于‘翠妃’,NAA的诱导效果好于其它三种。对于‘翠秀’,NAA、IAA的诱导差异不明显。在培养基中加2,4-D时,两个品种均无不定芽再生。 （6） 暗培养对‘翠妃’、‘翠秀’子叶不定芽诱导有显著的促进效果。暗培养7d可将不定芽再生率分别由51.98%、18.90%提高到77.44%、35.31%。但随着暗培养时间延长,子叶不定芽再生率下降。 （7） AgNO3对‘翠妃’、‘翠秀’的子叶不定芽再生有明显的抑制作用,且当浓度达到6mg/L以上时,两个品种的子叶块上均无不定芽再生,只长有少量的根。 （8） 通过考察增殖倍数,两个品种的最佳增殖培养基和增殖倍数分别是: ‘翠妃’:MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L,增殖倍数为5.40 ‘翠秀’:MS+BA0.75mg/L+NAA0.1mg/L,增殖倍数为5.06