目的:植物生长调节剂的研究与应用是新世纪农业实现增产、超产的主要措施之一。苯肽胺酸(Phthalanillic acid)是一种新型的植物生长调节剂,近年来在农业生产中应用广泛。由于苯肽胺酸属于低毒性农药,目前国内外关于苯肽胺酸的健康危害少有文献报道,对其免疫毒性作用尚未见报道。本实验研究以BALB/c小鼠为动物模型,从免疫器官、免疫细胞和免疫分子等不同水平对苯肽胺酸的免疫毒性作用进行了研究,以寻找敏感的免疫毒性评价指标,同时对主要免疫器官胸腺和脾脏的氧化损伤也进行了初步探讨,较为全面的对苯肽胺酸的免疫毒性作出评价,为进一步研究苯肽胺酸的免疫毒性作用机制奠定基础,对苯肽胺酸的合理使用及毒作用防治提供实验研究依据。方法:1.健康雄性BALB/c小鼠60只随机分四组:对照组(大豆油)、低剂量组(30mg/kg)、中剂量组(100 mg/kg)及高剂量组(300 mg/kg),每天经口灌胃染毒一次,连续28天。观察染毒过程中小鼠体重变化,末次染毒24 h后进行各项指标的测定。2.解剖称取主要脏器质量,并计算各脏器系数,血细胞分析仪进行血液学分析,对免疫器官胸腺和脾脏进行组织病理学检查。3.MTT法测定小鼠胸腺和脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力。4.ELISA法测定小鼠胸腺和脾脏中免疫因子IFN-γ和IL-4含量。5.测定小鼠胸腺和脾脏中氧化指标:TBA法测定MDA的含量,DTNB法测定GSH-Px活力,羟胺法测定T-SOD的活力。结果:1.一般毒性观测结果:整体观察,高剂量组小鼠脾脏色泽暗红,体积增大,且高剂量组脾脏脏器系数(0.38±0.04)%明显高于对照组(0.29±0.03)%,差异具有统计学意义(p<0.01);高剂量组小鼠血液wbc水平(3.55±1.63)×109/l与对照组(4.49±1.20)×109/l相比降低(p<0.05);高剂量组小鼠血液plt水平(455.54±81.37)×109/l也明显低于对照组(531.87±93.92)×109/l,p<0.05。he染色病理结果显示,苯肽胺酸暴露对胸腺组织没有明显的病理改变;与对照组比较,低剂量苯肽胺酸染毒组脾脏组织未观察到明显异常,中剂量和高剂量组脾脏出现大量炎细胞浸润,白髓减少,高剂量组脾窦血管扩张充血。2.淋巴细胞增殖试验结果:高剂量组cona诱导胸腺t淋巴细胞增殖能力(0.084±0.004,od值)与对照组(0.112±0.012,od值)相比降低(p<0.05);中剂量组和高剂量组脾脏t淋巴细胞增殖能力(0.125±0.047,0.125±0.031,od值)较对照组(0.174±0.050,od值)相比降低(p<0.05),各剂量组lps诱导小鼠胸腺和脾脏b淋巴细胞增殖能力较对照组无明显差异(p>0.05)。3.对免疫因子ifn-γ和il-4的影响:各剂量组小鼠胸腺中免疫因子ifn-γ和il-4水平与对照组相比均明显升高(p<0.01),各剂量组小鼠脾脏组织中ifn-γ和il-4变化不明显(p>0.05);与对照组相比,低剂量组ifn-γ与il-4比值有差异(p<0.01),而高剂量组无差异。4.对小鼠胸腺和脾脏氧化指标测定的结果:(1)对mda含量的影响:苯肽胺酸中剂量组和高剂量组小鼠脾脏组织中mda含量(1.39±0.15,1.39±0.08)nmol/mgport明显高于对照组(1.14±0.12)nmol/mgport,p<0.01;各剂量组小鼠胸腺组织中mda含量较对照组没有明显变化。(2)对t-sod的活力的影响:与对照组相比,苯肽胺酸各剂量组小鼠胸腺和脾脏组织中t-sod的活力变化不明显,p>0.05。(3)对gsh-px的活力的影响:与对照组(292.43±61.66)u/mgport相比,高剂量组小鼠胸腺组织中gsh-px的活力(197.21±78.27)u/mgport降低(p<0.05),脾脏组织中gsh-px的活力没有明显改变。结论:在本试验条件下,苯肽胺酸100 mg/kg可使小鼠免疫器官脾脏发生组织病理学损伤;剂量达300 mg/kg时,对Con A诱导下的小鼠胸腺和脾脏T淋巴细胞的增殖有明显的抑制作用;苯肽胺酸30 mg/kg即可使胸腺中免疫因子IFN-γ和IL-4含量明显升高,说明苯肽胺酸原药对机体有一定免疫毒性作用。苯肽胺酸100 mg/kg可使机体产生氧化应激,破坏小鼠氧化抗氧化平衡系统。通过对免疫器官、免疫细胞和免疫因子等方面进行综合评价,发现在本试验条件下免疫因子在免疫毒性评价中是最为灵敏的指标。