一、研究背景：　　红细胞寿命（red blood cell survival，RBCS）是指红细胞（red blood cell，RBC）从骨髓释放入外周循环后至被网状内皮系统清除所经历的时间。RBCS是一项重要的生理指标，是判断RBC生理病理变化的重要基础。准确测定RBCS有助于了解各种贫血及RBC破坏的原因，更是溶血性贫血诊断的金标准。　　在以往曾经尝试的方法中，51Cr标记法曾一度被视为“金标准”并成为临床检验项目，但由于其具有放射性危害，不宜用于婴儿、儿童和孕妇，并须对放射性废弃物进行处理，由此增加该方法的检测成本，且需要多次采集外周血，操作繁琐，测定周期长达一月以上，因此，目前全国各医院均已终止该项检查，国外也罕有医院使用[1]。15N-甘氨酸标记法虽属非同位素标记，但其除可标记Hb外，还可能标记其他蛋白质，并可被新产生的红细胞再利用，从而影响检测结果，且该法需要通过质谱分析仪进行检测，也影响了其在临床的应用[1]。生物素标记法虽然没有放射性损害，但同样存在测试需耗时一个月以上的缺点，而且生物素是一种异体蛋白，有引起变态反应的潜在危害[1]。　　研究发现，人体呼出气体中的一氧化碳（carbon monoxide，CO）主要来源于内源性产生和外源性吸入。前者来源于血红素降解（占86％以上）和非血红素代谢（不超过14%）。而来源于血红素降解的CO中，85%又来自红细胞降解，15%来自非红细胞Hb。因此，呼出气体的内源性CO中，约70%来自于红细胞降解。当Hb分解为胆红素时，Hb中的α-亚甲基碳生成CO，即1个Hb产生1个CO分子。因此，在排除外源性CO干扰的前提下，可由呼气末CO（end-tidal CO，ETCO)推算出红细胞的代谢速度[2-3]。　　根据Strocchi[4]等的研究结果，当机体红细胞处于生成速度等于破坏速度的稳态时，或者说Hb处于合成速度等于分解速度时，可通过检测ETCO和外周血Hb浓度，并根据下列公式计算RBCS：　　RBCS（d）=外周血Hb水平（g/mL）×1380/ETCO（ppm）　　然而，目前尚无利用CO呼气试验检测大样本健康受试者的RBCS的研究，更无儿童青少年RBCS参考范围可据，也无有关影响RBCS检测结果的因素的系统研究。有鉴于此，本研究拟利用CO呼气试验检测正常儿童青少年ETCO及RBCS，并探讨影响检测结果的因素，以期为该法推广应用于临床奠定基础，并为贫血的鉴别诊断提供依据。　　二、研究目的：　　1.建立正常儿童青少年ETCO及RBCS的参考范围。　　2.探讨影响儿童青少年ETCO及RBCS检测结果的因素。　　三、研究内容：　　1.检测正常儿童青少年的ETCO及RBCS，建立正常儿童青少年ETCO及RBCS的参考范围。　　2.分析影响儿童青少年ETCO及RBCS检测结果的因素。　　四、研究方法：　　1.研究对象入选标准：年龄7~18岁，从广州市区小学二年级、初中一年级、高中一年级学生中选取，作为三个年龄组，每组50名，性别不限；Hb、MCV、Ret、WBC及IBIL等均在正常值范围。排除标准：不符合上述入选标准中的任何一项者，或检测时存在感染，或心、肝、肾等脏器功能不全者，或有急性或慢性出血者，或检测前24小时内有主动和/或被动吸烟者。剔除标准：无法配合呼出气体采集者，或气体标本保存不佳者。　　2.信息登记记录正常儿童受试者的年龄、性别、月经情况、吸烟史、输血史、既往病史、用药史和家族病史等信息。　　3.辅助检查血常规、网织红细胞百分比及绝对值和肝功能；经呼出气体检测RBCS＜-x-1s者，进一步进行以下检查：红细胞形态、尿液分析、抗人球蛋白试验、葡萄糖6-磷酸脱氢酶活性检测、Hb分析、红细胞渗透脆性试验、腹部B超。　　4.气体采集，ETCO及RBCS检测在上述辅助检查的当天进行。　　①肺泡气采集：受试者手持肺泡气采集装置，吹气嘴端靠近胸前，深吸一口气后即屏住呼吸8~10秒，再用嘴含住吹气嘴往里吹气，一口气吹完。如手压肺泡气采集袋下陷＜1厘米，提示采集气体量已够；反之则应用手反复挤压腔道气体袋使其气体排空至肺泡气采集袋，直至其充气量足够。肺泡气采集袋吹满后从采气装置上拔下并盖紧盖子，肺泡气采集完毕。　　②环境空气采集：检测者捏压手泵，直至环境气采集袋充满气体，然后立即将手泵拔下并盖紧盖子，环境空气采集完毕。　　③上机检测ETCO及RBCS：将肺泡气采集袋和环境气采集袋分别插在仪器“肺泡气”和“本底气”的气嘴上，同时在两个“倒气袋”气嘴上分别插上两个倒气袋。气袋处的四个指示灯全亮后,按下“INPUT/输入”键，进入Hb值输入界面，输入受试者当天测得的Hb值（单位g/L）。随后，按下“RUN/测量”键开始测量。测量结束后，显示屏即可显示ETCO和RBCS值。　　5.影响因素及分组　　①年龄：小学二年级、初中一年级和高中一年级，共3组；　　②性别：男、女，共2组；　　③月经周期：月经期（从月经来潮直到出血停止）、非月经期，共2组；　　④吸烟：检测前24小时内有主动吸烟（或被动吸烟）、无吸烟，共2组；　　⑤腔道气体袋大小：300mL腔道气体袋、200mL腔道气体袋，共2组；　　⑥肺泡气体标本：气袋漏气、气袋不漏气，共2组。　　6.统计分析　　①检测数据用计量资料表示，运用SPSS18.0统计软件对实验数据进行整理和统计分析；对数据进行正态性和方差齐性检验；采用t检验或Mann-Whitney U检验比较两组间的均值,用方差分析或Kruska-Wallis H检验比较3组及以上的均值；以上检验均以α=0.05为检验水准。　　②分析正常儿童ETCO和RBCS检测结果的整体偏度系数和峰度系数，并进行正态性检验。如数据符合正态分布，确定其95%参考范围为“-x-1.96s~-x+1.96s”，99%参考范围为“-x-2.58s~-x+2.58s”；如数据不符合正态分布，则用百分位数表示，确定其95%参考范围为P2.5~P97.5，99%参考范围为P0.5~P99.5。　　五、研究结果：　　1.ETCO及RBCS检测结果及参考值范围222名7.02~17.68岁的正常儿童青少年的ETCO为1.589±0.391ppm，95%参考范围为0.895~2.231ppm，99%参考范围为0.683~2.443ppm；RBCS为126±32天，95%参考范围为72~174天，99%参考范围为56~190天。　　2.RBCS与ETCO、Hb、Ret%、IBIL的相关性分析RBCS与ETCO、IBIL均呈负相关（r=-0.890，p=0.000；r=-0.331，p=0.000）；RBCS与Hb、Ret则无相关性（r=0.036，p=0.595；r=-0.043，p=0.525）。　　3.正常儿童ETCO和RBCS的影响因素分析年龄、性别、月经期、腔道气袋大小对ETCO和RBCS检测结果无影响，而吸烟及肺泡气体标本漏气则影响ETCO和RBCS检测结果。　　六、结论：　　1.CO呼气试验检测ETCO和RBCS具有无创、安全、简便、快速、稳定的优点。　　2.正常儿童青少年的ETCO为1.589±0.391ppm，95%参考范围为0.895~2.231ppm，99%参考范围为0.683~2.443ppm。　　3.正常儿童青少年的RBCS为126±32天，95%参考范围为72~174天，99%参考范围为56~190天。　　4.RBCS与ETCO、IBIL呈负相关，与Hb、Ret无相关性。　　5.年龄、性别、月经期、腔道气袋大小对ETCO和RBCS检测结果无影响，而吸烟及肺泡气体标本漏气则影响ETCO和RBCS检测结果。