髓样分化因子88在妊娠期糖尿病发病机制中的作用研究

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目的:本研究通过调控GDM孕妇和正常妊娠孕妇体外培养下外周血单核细胞中髓样分化因子88(MyD88)的蛋白表达水平,检测对比 GDM组与正常组调控前后单核细胞中蛋白(MyD88)和细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达水平,来研究MyD88在妊娠期糖尿病(GDM)发病机制中的作用。  方法:选取在我院内分泌实验室行口服葡萄糖耐量实验(OGTT)的妊娠妇女,将30例OGTT异常的孕妇纳入GDM组,同时选取在我院产科门诊正常产检的30例孕妇纳入正常组。采集所有受试者晨起空腹外周静脉血15mL,采用密度梯度离心法分离收集外周血单核细胞。正常组和GDM组中每个样本处理均相同,每个样本各分为4个组,分别为未处理组(空白对照)、LPS组(加入LPS刺激)、ST2825组(加入ST2825抑制)、LPS+ST2825组(加入ST2825预处理后再加入LPS刺激)。采用蛋白印记法(Western blot,WB)检测并比较各组单核细胞中 MyD88表达量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测并比较各组培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-10(IL-10)的表达水平。  结果:(1)GDM组孕妇外周血单核细胞中MyD88蛋白表达量及血清细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达水平均高于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)体外培养下,正常组和GDM组组内的蛋白比较:LPS组的MyD88的表达量高于同组未处理组;ST2825组的MyD88的表达量低于同组未处理,差异有统计学意义(P<0.05);LPS+ST2825组的MyD88的表达量明显低于同组的LPS组(P<0.05)。  (3)体外培养下正常组与GDM组组间的蛋白比较:GDM组各处理组MyD88的表达水平均较正常组相同处理组明显升高(P<0.05)。  (4)体外培养下,正常组和 GDM组细胞因子的比较:GDM组中未处理组和LPS组中的细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达水平均高于正常组中未处理组及LPS组(P<0.05)。  (5)体外培养下,GDM组组内细胞因子的比较:GDM组中 LPS组细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达水平高于其未处理组(P<0.05);ST2825组细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达低于其未处理组(P<0.05);LPS+ST2825组细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达低于其LPS组(P<0.05)。  (6)体外培养下,正常组和GDM组中除未处理组外,其他各处理组中的MyD88与细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)的表达水平均呈正相关关系(P<0.05)。  结论:调控 GDM孕妇单核细胞中上游 MyD88的活化程度,下游细胞因子(TNF-α、IL-1、IL-10)水平发生相应变化,提示MyD88可能参与了GDM的发生并在其发病机制中起着重要作用。
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