【摘 要】
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【目的】共激活相关精氨酸甲基转移酶1(CARM1)在多种肿瘤中表达上调并能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。但目前对CARM1在食管癌的发生发展过程中的作用尚不清楚。本研究主要探讨CARM1对食管癌细胞的增殖、迁移能力等方面的影响,并对其可能的分子机制进行初步的探索。【方法】1、采用免疫组织化学方法检测食管癌组织和癌旁正常组织中CARM1的表达情况,并研究其与患者生存期的关系。2、采用聚合酶链式反应
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【目的】共激活相关精氨酸甲基转移酶1(CARM1)在多种肿瘤中表达上调并能促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。但目前对CARM1在食管癌的发生发展过程中的作用尚不清楚。本研究主要探讨CARM1对食管癌细胞的增殖、迁移能力等方面的影响,并对其可能的分子机制进行初步的探索。【方法】1、采用免疫组织化学方法检测食管癌组织和癌旁正常组织中CARM1的表达情况,并研究其与患者生存期的关系。2、采用聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹法检测食管癌细胞系中CARM1的m RNA和蛋白水平表达情况。利用特异sh-RNA分别敲低食管癌细胞系KYSE510和TE-1中CARM1的表达以及利用过表达质粒上调食管癌细胞系KYSE150和ECA9706中CARM1的表达水平。3、采用CCK-8生长曲线分别检测敲低和上调CARM1后食管癌细胞增殖能力的改变,平板克隆形成实验检测CARM1对食管癌细胞克隆形成能力的影响,利用Transwell小室实验和划痕愈合实验分别检测敲低和上调CARM1后食管癌细胞迁移能力的变化情况。Western blotting检测CARM1对上皮间质转化相关指标E-cadherin、N-cadherin、Snail、Vimentin、Slug的蛋白水平变化,初步探讨CARM1促进EMT的分子机制。【结果】1、免疫组织化学实验结果显示CARM1蛋白在食管癌组织中表达显著升高,CARM1的水平与食管癌患者的生存期呈负相关。2、聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹实验结果显示CARM1的m RNA和蛋白水平在食管癌细胞系中表达显著上调。敲低CARM1后食管癌细胞的迁移和增殖能力显著减弱;过表达CARM1后食管癌细胞的迁移和增殖能力明显增强。【结论】本研究表明,与癌旁正常组织相比,CARM1在食管癌组织中表达显著上升,CARM1在促进食管癌细胞生长和癌症进展过程中发挥重要作用。综上所述,CARM1的表达水平能有效预测患者的预后,有望成为临床治疗食管癌的一个潜在靶点。
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