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黄芪多糖(Astragalus polysaccharide, APS)是中药黄芪的主要活性成分之一,具有增强免疫、抗病毒病、抗脂质过氧化损伤、抗肿瘤等作用。目前,市场上黄芪多糖多靠提取而来,有水提、酶提、微波提取方法等,但存在提取率低、稳定性差、纯化难度大、操作步骤复杂、能耗高或周期长等问题。近年来,越来越多的人关注发酵对中药有效成分提取和药效作用的影响。本实验室前期研究发现,黄芪经非解乳糖链球菌FGM(Streptococcus alactolyticus FGM)发酵后,产物中多糖得率有显著提高。但FGM发酵黄芪的工艺不够稳定,发酵提取的多糖通过树突状细胞调节免疫的机理尚未研究。故本论文开展了FGM发酵黄芪的工艺优化和稳定性评价试验,利用优化的工艺提取和纯化发酵黄芪多糖(Fermented Astragalus polysaccharide, FAPS);在体外分析了FAPS对小鼠树突状细胞成熟的影响,旨在为阐述FAPS影响机体免疫应答反应的作用机制提供理论依据。(1)通过单因素试验分别评价了发酵时间、发酵温度、接菌量和pH值对FAPS产量的影响；在此基础上设计正交试验(L93/4),进一步优化最佳工艺,结果显示：温度39°C、接菌量5%、pH5.4、培养时间48h条件下多糖产量最高,4个因素对发酵过程的影响顺序依次为温度>接菌量>pH值>发酵时间；重复验证试验结果表明,该条件下多糖含量增加可稳定在2.7±0.52倍。(2)为了获得纯度较高的发酵黄芪多糖,开展了柱层析分离研究。将黄芪发酵液离心,药渣用10倍体积纯水90°C温浸提取3h,离心后合并上清液,浓缩至1mg/mL后sevag法除蛋白,透析72h,无水乙醇、乙醚、丙酮分别洗涤,烘干后所得的发酵黄芪质量分数可达68.29；再经离子交换柱层析和分子筛柱层析纯化,苯酚硫酸法测得纯后的发酵黄芪多糖质量分数为96.12。(3)比较了FAPS和APS对小鼠树突状细胞(BMDCs)体外成熟的影响。结果表明,APS和APS作用小鼠BMDCs后,表型MHC-Ⅱ、CD80、CD86和CD83的表达量较对照组显著提高(p<0.05),细胞因子IL-12、IL-6、IFN-γ和TNF-α分泌水平较对照组显著提高(p<0.05),ACP活性较对照组显著降低(p<0.05)。FAPS对表型CD86和CD80、细胞因子IL-12和TNF-α的表达影响显著高于APS (p<0.05)。结果提示,FAPS和APS均能促进BMDCs成熟分化,益生菌FGM发酵黄芪的过程有改善多糖诱导小鼠BMDCs体外成熟分化的作用。