论文部分内容阅读
积雪草酸（asiatic acid,AA）,是积雪草提取物中的五环三萜烯类组分,它具有多方面的药理作用,主要包括:抗肝损伤、抗氧化、抗炎、神经保护和抑制肿瘤细胞增殖等作用,但AA的在体抗肿瘤作用未见报道。本文首先在人肝癌细胞株（HepG2）,黑色素瘤细胞株（B16）,宫颈癌细胞株（Hela）上观察了积雪草酸的剂量依赖性细胞毒性效应。测得AA抑制B16,HepG2,Hela增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为68μmol/L,30μmol/L,85μmol/L。积雪草酸（AA）的溶解度不够理想,可能是影响其治疗效果的原因之一。因此我们采用饱和水溶液法制备AA的β-环糊精（β-CD）包合物（β-CD-AA）,研究其各项性质,同时采用急性炎症和急性肝损伤模型,检测包合物药理作用的改善情况。结果证明经过β-CD包合后,AA的溶解性质得到明显改善,其累计释放率由33%提高至44%。经过环糊精包埋过后的AA抗炎效果有所增强,另外,β-CD-AA有较好的抗肝损伤作用,环糊精包合后,给药剂量可以降低。在C57小鼠的B16实体瘤模型上观察AA单独作用的抑瘤效果,发现50mg·kg-1和100 mg·kg-1AA单独作用的抑瘤效果不够理想,而20 mg·kg-1环磷酰胺（CTX,阳性对照）有良好的抑瘤效果,因此采用AA与CTX联合给药,分别在B16实体瘤、Heps实体瘤、Heps腹水瘤和艾氏腹水瘤（EAC）模型上观察两药联用的效应,以期达到AA对CTX增效减毒的目的。结果发现,AA没有起到增强CTX抗肿瘤作用的效果,但也没有对抗CTX的抗肿瘤作用。检测CTX毒性发现,AA可以对抗CTX诱导的Heps实体瘤小鼠肝组织中GSH的活力降低,说明AA可以对抗CTX的氧化损伤,增强机体的抗氧化能力;同时,在Heps腹水瘤和艾氏腹水瘤（EAC）模型上均发现AA有延长荷瘤小鼠寿命的作用,具体机制有待于进一步的研究。为了能够探明CTX的致毒机制,找出其毒性作用的靶点,以便更有针对性地对正常细胞进行保护,我们又采用正常ICR小鼠,给予大剂量的CTX造成损伤,结果表明CTX可引起肝脏氧化损伤,其作用机制可能与诱导线粒体功能变化及改变线粒体外膜上的电压依赖性阴离子通道VDAC表达水平有关,而AA可能通过保护线粒体的功能来对抗CTX引起的损伤。以上结果提示,AA的抗肿瘤应用可能还有待于剂型的进一步优化。