VQ蛋白(Valine-glutamine motif containing proteins)是一类重要的转录调控辅助因子,不仅参与调节植物花、叶、种子和下胚轴等器官的生长发育,还参与调节植物对盐、干旱、温度和病原菌等胁迫的应答。本研究克隆了苹果Md VQ17基因,分析了Md VQ17在干旱和盐胁迫下的表达模式,并通过转基因技术鉴定了Md VQ17对干旱和盐胁迫的抗性调控功能。主要结果如下:1.苹果Md VQ17基因全长486 bp,编码蛋白长度为161 aa;启动子顺式作用元件分析表明,Md VQ17启动子序列中含有多个响应逆境胁迫的顺式作用元件;亚细胞定位试验表明,Md VQ17蛋白定位在细胞核和细胞膜;q RT-PCR试验表明,Md VQ17基因的表达水平受干旱和盐胁迫诱导。2.酵母双杂交试验表明,Md VQ17蛋白能够与苹果WRKY转录因子家族I和IIc亚组中的蛋白相互作用,但与其它Md VQ蛋白不存在相互作用。另外,苹果Md VQ17的VQ结构域及其侧翼序列是与WRKY转录因子相互作用所必需的。3.过量表达Md VQ17增强了拟南芥在种子萌发、幼苗生长和成苗生长阶段对干旱和盐胁迫的抗性。在不同浓度甘露醇和氯化钠处理下,Md VQ17过量表达拟南芥的种子萌发率、幼苗鲜重明显高于野生型;在干旱和盐胁迫下,Md VQ17过量表达提高了转基因拟南芥的脯氨酸含量、SOD活性、POD活性和CAT活性,同时降低了叶片失水率、相对电导率、MDA含量、超氧阴离子和过氧化氢含量。此外,过量表达Md VQ17转基因拟南芥中多个胁迫诱导基因的转录水平明显高于野生型。因此,过量表达Md VQ17转基因拟南芥提高了抗旱耐盐能力。4.Md VQ17过量表达提高了苹果‘王林’愈伤的抗盐和抗渗透胁迫能力。在氯化钠和甘露醇处理下,Md VQ17转基因苹果愈伤的鲜重明显高于对照,表现出比对照更强的抗逆性。表达分析表明Md VQ17转基因愈伤中部分胁迫诱导基因的转录水平明显高于对照,说明Md VQ17过量表达能够促进胁迫相关基因的转录,从而提高了转基因‘王林’苹果愈伤对渗透和盐胁迫的耐受能力。