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目的抗肿瘤免疫疗法是一种重要的癌症辅助治疗手段。抗肿瘤免疫治疗通过调动机体免疫细胞的功能,刺激机体产生抗肿瘤免疫应答,以达到防御并杀伤肿瘤细胞的目的。免疫疗法具有毒副作用小,可诱发针对肿瘤细胞的持久免疫反应且有助于清除术后体内残存的肿瘤细胞并改善预后等优点。然而,由于肿瘤细胞的免疫原性较弱并具有免疫逃逸机制等原因,目前抗肿瘤免疫治疗的效果尚不够稳定。为提高肿瘤抗原的免疫原性,增强免疫系统对肿瘤细胞的识别及杀伤,我们以生物相容性及降解性俱佳的聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA-COOH)为材料,构建了肿瘤抗原的纳米载体,通过对肿瘤蛋白的连接或包裹,筛选出对蛋白运载效率较高的纳米颗粒,并在体外初步评估了其抗乳腺癌的免疫效应。方法本课题使用超声乳化-溶剂挥发法制备了连接肿瘤蛋白的纳米颗粒,通过缩合反应将蛋白连接至纳米颗粒上,并优化了制备及缩合反应的条件,以改善纳米颗粒的性质和提高其对蛋白的连接效率。本课题使用改良的二次乳化法制备包裹了肿瘤蛋白的纳米颗粒,并对包裹效率、粒径、形态和Zeta电位进行测定,优化制备参数以提高纳米颗粒对蛋白的包裹效率。然后,从上述两种纳米颗粒中,选出对蛋白运载效率较高且制作简便的一种以运送乳腺癌裂解蛋白。最后,本课题采用MTS细胞毒实验,在体外初步检测了该纳米颗粒是否能提高人淋巴细胞对MCF 7乳腺癌细胞的杀伤。结果本研究显示,纳米颗粒对蛋白的包裹效率高于连接效率。在PLGA为2mg,蛋白的初始投入量为100ug的情况下,纳米颗粒对蛋白的包裹效率约为85%,而连接效率约为60%。并且,包裹蛋白的纳米颗粒粒径的均一程度较高,前者粒径主要分布在80nm附近,而后者粒径分布在60-100nm之间。通过扫描电镜观察,所制备的包裹MCF7乳腺癌裂解蛋白的纳米颗粒呈球形,表面较光滑,颗粒之间无粘连,分散性良好。采用包裹蛋白的纳米颗粒为运送乳腺癌肿瘤抗原的载体,发现该纳米粒能显著提高人淋巴细胞在体外对乳腺癌细胞的杀伤能力,其杀伤效果约是游离肿瘤蛋白的3倍(P<0.05)。结论本课题构建了运送乳腺癌肿瘤抗原的纳米颗粒,并摸索了其优化的制备条件。所得包裹MCF7裂解蛋白纳米颗粒理化性质优良,对肿瘤蛋白的运载效率较高,在体外实验中可提高对乳腺癌细胞的杀伤。乳腺癌是危害女性健康的重大疾病,因而研发新型抗乳腺癌免疫疗法十分必要。本课题将纳米技术应用于提升抗乳腺癌免疫反应,提示纳米载体在开发全新的抗乳腺癌免疫疗法方面具有应用潜能。