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硫辛酸（α-lipoic acid,LA）是一种拥有两个功能基团的小分子天然化合物,是多种参与新陈代谢的关键酶的辅助因子,在人体内的分布包括两种形式:氧化形态的α-硫辛酸以及还原形态的二氢硫辛酸。硫辛酸是已知天然的效果最强的抗氧化剂,化学名称为1,2-二硫戊环-3-戊酸,在体内的肝脏和肾脏含量分布最高。硫辛酸是兼具水溶性及脂溶性的两性分子,无论是氧化型还是还原型在水、脂环境中均能发挥很强的抗氧化作用,同时它也具有促氧化功能,可以清除自由基和活性氧,鳌合金属离子,再生谷胱甘肽以及维生素C/E等抗氧化剂,它还可以改善糖代谢,对糖尿病性白内障、糖尿病引起的多发性神经病以及心血管损伤具有较好的预防和治疗作用。由于其强大的抗炎、抗氧化功能,近年来越来越多的研究证实其具有抗动脉粥样硬化及抗肿瘤的功效。动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）是一种以脂质及胆固醇不断在动脉壁聚集沉积为特征的慢性炎症疾病,是世界范围内心血管系统疾病主要的致死原因。尤其针对绝经后女性这一特殊群体,由于失去了雌激素抗炎、抗氧化、抗内皮细胞凋亡、降低血脂、胆固醇、增加蛋白质合成等等的保护作用,绝经后女性动脉粥样硬化（postmenopausal atherosclerosis）的治疗显得尤为棘手。近年来的研究发现,雌激素替代疗法（hormone replacement therapy,HRT）治疗绝经后动脉粥样硬化虽然能够在短期内取得明显的临床症状缓解,但在长期随访中发现其并不能明显改善预后,且HRT增加了患者罹患妇科肿瘤的风险。而硫辛酸作为天然抗氧化剂,可以通过清除体内过量的活性氧（reactive oxygen species,ROS）从而提高雌激素受体（estrogen receptors,ERs）的表达,促进雌激素发挥抗动脉粥样硬化的功能,进而对绝经后动脉粥样硬化这一特殊群体的临床治疗产生积极的推动作用。在世界范围内,卵巢癌在妇科肿瘤中的发病率位居第三位,而死亡率位居首位。原发性卵巢癌起病过程隐匿,给早期发现早期诊断带来极大困难,超过80%的患者在确诊时已处于晚期。目前,卵巢癌5年生存率仅为44%左右。对于早期卵巢癌患者主要以手术治疗为主,晚期患者行肿瘤细胞减灭术,辅助以化疗。作为卵巢癌化疗的基础用药,顺铂具有抗癌谱广、疗效确切、与多种抗肿瘤药物有协同作用且无交叉耐药等特点,但其毒副作用较明显,常见的有胃肠道反应,过敏反应,神经毒性,肾脏毒性,骨髓抑制等。所以近年来大量的研究在寻找与顺铂联合应用的药物,以期降低顺铂的用药剂量或改善顺铂造成的毒副作用。硫辛酸作为一种可以在体内合成含硫脂肪酸,被看作是维生素,毒性较低。它可以通过促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,抑制肿瘤新生血管生成,增强机体免疫力,增加肿瘤对化疗药物敏感性,逆转肿瘤耐药等作用来发挥抗肿瘤作用。本文旨在研究硫辛酸联合顺铂治疗卵巢癌的疗效,为临床治疗卵巢癌减轻基础用药毒副作用提供新的思路。第一部分联合应用硫辛酸和顺铂对卵巢癌细胞的治疗作用的研究目的:顺铂作为临床治疗卵巢癌的基础用药具有较明显的毒副作用,本研究旨在探讨硫辛酸联合顺铂治疗卵巢癌的疗效,以减小顺铂的用药剂量,改善顺铂的毒副作用。方法:用硫辛酸和顺铂单独或联合处理3种卵巢癌细胞系SKOV3、EFO27、IGROV1,采用克隆形成实验、3D-Culture实验观察硫辛酸和顺铂单独或联合应用对3种卵巢癌细胞的抑制效率,利用划痕实验观察硫辛酸和顺铂对3种卵巢癌细胞迁移能力的影响,利用彗星实验、免疫荧光实验观察硫辛酸和顺铂对3种卵巢癌细胞DNA损伤和修复过程的影响。结果:1、硫辛酸和顺铂都可以呈剂量依赖性的抑制卵巢癌细胞的增殖,且联合应用硫辛酸和顺铂抑制效果更加明显;2、硫辛酸和顺铂都可以抑制卵巢癌细胞迁移,且联合应用抑制迁移的效果更加明显;3、硫辛酸和顺铂都可以导致卵巢癌细胞DNA损伤,且联合应用,效果更加明显。结论:1、硫辛酸和顺铂均可以抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移,导致卵巢癌细胞DNA损伤,且联合应用,效果更加明显;2、联合应用硫辛酸和顺铂是治疗卵巢癌的有效方案。第二部分硫辛酸治疗绝经后女性动脉粥样硬化及机制的研究目的:绝经后女性由于失去了雌激素抗炎、抗氧化、抗内皮细胞凋亡、降低血脂、胆固醇、增加蛋白质合成等的保护作用,患动脉粥样硬化的风险大大增加。而近年来研究发现,雌激素替代疗法虽然可以显著缓解临床症状,但并不能改善预后。本研究旨在探讨硫辛酸通过清除体内过量的活性氧,解除活性氧对雌激素受体的抑制作用,从而上调雌激素受体的表达,促进雌激素发挥抗动脉粥样硬化的生理功能,为临床治疗绝经后女性动脉粥样硬化提供新的思路。方法:1、我们随机将40只16周龄LDL-R-/-雌鼠均分为5组,第1组饲喂正常饮食;第2组饲喂高脂饮食;第3组行卵巢去势手术后饲喂高脂饮食;第4组行卵巢去势手术后饲喂高脂饮食,同时进行低剂量硫辛酸（70 mg/kg）灌胃;第5组行卵巢去势手术后饲喂高脂饮食,同时进行高剂量硫辛酸（210 mg/kg）灌胃。灌胃持续16周,每周监测小鼠体重变化,随后将小鼠处死,血液样本经离心后将血清保存于-80°;2、人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells,HAECs）经过不同浓度硫辛酸（75,150,300μM）处理20小时后加入H2O2（1.2mM）4小时,以诱导氧化应激损伤;3、采用乳酸脱氢酶、丙二醛、过氧化物歧化酶、谷胱甘肽试剂盒检测经过H2O2和硫辛酸处理后的HAECs的LDH、MDA、SOD、GSH水平的变化;4、采用免疫印迹法（Western Blot）实验检测Cleaved Caspase-3、Bcl-2、ICAM-1、VCAM-1、Nox4、p22phox、I?Bα、phosphorylated p65、ERα、ERβ相关蛋白的表达;5、采用免疫荧光（immunofluorescent assay,IF）方法检测p65、ERα基因的表达;6、采用流式细胞仪分析硫辛酸对HAECs细胞内产生的活性氧（reactive oxygen species,ROS）的清除率;7、采用免疫组化（Immunohistochemistry,IHC）方法检测CD68、ICAM-1、VCAM-1、Nox4、phosphorylated p65的表达。结果:1、硫辛酸保护HAEC细胞免受H2O2诱导的氧化应激损伤;2、硫辛酸既可以在细胞层面上抑制内皮细胞凋亡,也可以在动物水平上抑制小鼠主动脉内皮细胞及粥样斑块的凋亡;3、硫辛酸能够抑制由H2O2引起的黏附因子ICAM-1、VCAM-1的过表达,抑制THP-1（Human acute monocytic leukemia cell）细胞黏附于受损的内皮细胞;4、硫辛酸能够抑制由H2O2引起的Nox4、p22phox的过表达;5、硫辛酸能够上调I?Bα的表达,同时下调phosphorylated p65的表达;6、硫辛酸能够上调雌激素受体的表达;7、与卵巢去势饲喂高脂饮食组相比,硫辛酸灌胃组小鼠体重增加并不明显;8、硫辛酸能明显抑制小鼠主动脉内粥样硬化斑块的形成。结论:1、硫辛酸能够抑制氧化应激、抑制内皮细胞凋亡、抑制黏附因子ICAM-1、VCAM-1的表达,从而抑制单核/巨噬细胞系统黏附于受损的内皮细胞表面;2、硫辛酸通过下调Nox4、p22phox的表达来抑制活性氧的产生,从而解除活性氧对雌激素受体的抑制作用,上调雌激素受体的表达;3、硫辛酸通过抑制NF-?B信号通路的活化来发挥抗炎功能;4、硫辛酸可以降低小鼠血脂、胆固醇、低密度脂蛋白,升高高密度脂蛋白的水平;5、硫辛酸有潜力替换雌激素替代疗法成为临床治疗绝经后女性动脉粥样硬化的药物制剂。