[目的]在常见恶性肿瘤中,肝癌发病率居第4位,死亡率居第2位。肝癌的预后较差,早期诊断是提高生存率的关键,但目前常用的肝癌肿瘤标记物对肝癌的早期诊断价值不足,血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3,GPC3)表达在肝癌早期就可发生,因此,本研究拟探讨如下问题:1.血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3,GPC3)、维生素K缺乏或拮抗剂-Ⅱ 诱导的蛋白质(Protein Induced by Vitamin K Absence or Antagonist-Ⅱ,PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(Alpha Fetal Protein,AFP)单独及联合对肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)的诊断价值;2.血清GPC3、PIVKA-Ⅱ、AFP对HCC的疗效监测价值;3.肝癌组织中GPC3的表达情况,并探究GPC3表达与临床特征的关系;4.HCC组织中GPC3阳性表达对HCC患者预后的影响;5.组织GPC3表达与血清GPC3表达的一致性及相关性探讨。[方法]1.纳入云南省肿瘤医院2018年1月至2019年10月期间的190例HCC病例作为肝癌组,采集肝癌组全部患者治疗前血清标本,并采集其中30例治疗后1-3个月患者血清,此外,采集其中行手术治疗的111例HCC患者术后组织标本;另外收集10例胆管细胞型肝癌(Intrahepatic Cholangiocarcinoma,ICC)患者术后组织标本。纳入69例健康体检者作为健康对照组,65例良性肝病患者作为良性肝病组,采集两组患者血清标本。2.用电化学发光法(Electrochemiluminescence method,ECL)检测三组患者血清AFP,化学发光微粒子免疫分析法(Chemiluminescence Microparticle Immuno Assay,CMIA)检测 PIVKA-Ⅱ,酶联免疫法(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测 GPC3,并绘制受试者工作曲线(Receiver operating characteristic curve,ROC)曲线,探讨三个指标单独及联合对HCC的临床诊断价值;比较三个指标治疗前后的变化,分析三个指标对HCC的疗效监测价值。3.肝癌组织标本进行免疫组化染色,以癌旁健康肝组织为对照,观察GPC3在HCC组织及ICC组织中的表达情况。分析HCC组织中GPC3表达与年龄、肿块大小、组织学分级、巴塞罗那分期、HBsAg的关系。随访行手术治疗的1 11例HCC患者,观察总生存(Overall survival,OS)及无病生存期(Disease Free Survival,DFS),分析HCC组织GPC3表达与生存期的关系;探讨组织及血清GPC3表达的一致性及相关性,并分析二者不一致的原因。[结果]1.肝癌组AFP、PIVKA-Ⅱ、GPC3均高于良性肝病组及健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);良性肝病组AFP高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05);良性肝病组和健康对照组血清GPC3、PIVKA-Ⅱ水平无差异(P>0.05)。2.AFP、PIVKA-Ⅱ、GPC3 诊断 HCC 的 ROC 曲线下面积(Area under curve,AUC)、灵敏度、特异度分别为:0.873、66.32%、93.28%;0.901、86.84%、87.31%;0.879、80.00%、90.30%;GPC3 和 PIVKA-Ⅱ 诊断 HCC 的灵敏度高于 AFP,差异有统计学意义(χ2分别为21.02、9.06,P<0.05);GPC3与PIVKA-Ⅱ联合后,可提高其对HCC的诊断价值,并使灵敏度、特异度有所提高(0.893,81.58%,91.79%)。同时联合AFP及PIVKA-Ⅱ后也可以提高GPC3对HCC的诊断价值(0.893,81.05%,91.79%)。3.HCC患者治疗后血清GPC3、PIVKA-Ⅱ、AFP水平均低于治疗前(Z值分别为-2.30,-2.58,-3.38,P<0.05)。早期 HCC 患者术后血清 GPC3、PIVKA-Ⅱ、AFP低于治疗前,差异有统计学意义(Z值分别为:-2.74,-3.51,-3.29,P<0.05)。中晚期HCC患者治疗前后血清GPC3、PIVKA-Ⅱ、AFP水平无显著差异(P>0.05)。4.111例HCC组织中,96例呈GPC3阳性,阳性率86.50%,癌旁健康对照组织中仅1例呈阳性表达。10例ICC组织中1例呈阳性表达。GPC3表达与年龄、肿块大小无关(P>0.05),与组织学分级、HBsAg、巴塞罗那分期(Barcelona Clinic Liver Cancer,BCLC)相关(P<0.05)。5.生存分析显示GPC3(+)组患者1年无病生存率明显低于GPC3(-)组(70.60%vs 92.30%,P<0.05),随着GPC3表达强度的增加(GPC3阴性,1+,2+,3+)患者的 1 年无病生存率分别为(92.30%、83.90%、73.40%、65.80%),呈递减趋势,经log-rank检验,P>0.05,差异无统计学意义;两组1年总体生存率差异无统计学意义(89.00%vs 100.00%,P>0.05),随着GPC3表达强度的增加,1年总体生存率分别为(100.00%,100.00%,96.00%,82.60%),差异无统计学意义。6.96例组织呈GPC3阳性表达的HCC患者中,17例血清GPC3水平低于cut-off值(0.103ng/ml),占17.71%;15例组织呈GPC3阴性表达的HCC患者中,血清中能检测到GPC3高于cut-off值的有4例患者,血清GPC3水平分别为:0.105ng/ml,0.106ng/ml,0.108ng/ml,0.203ng/ml,占 26.67%。经 Spearman等级相关统计分析,结果显示GPC3在组织中的表达强度与血清中GPC3水平呈正相关,相关系数rs=0.624。[结论]1.GPC3具有作为HCC诊断辅助标志物的潜力,对HCC具有良好的诊断价值,与PIVKA-Ⅱ联合检测可以提高HCC检出率。2.GPC3、PIVKA-Ⅱ、AFP三个指标对HCC的疗效监测具有一定的临床应用价值。3.GPC3在HCC组织中高表达,在ICC组织、癌旁健康对照组织中几乎不表达;HCC组织中GPC3表达与组织学分级、HBsAg、BCLC分期等因素有关;HCC组织GPC3表达强度与血清GPC3水平呈正相关;组织GPC3(+)组患者1年无病生存率明显低于GPC3(-)组,组织GPC3表达情况对HCC患者预后评估具有一定价值。