毛囊是一种结构复杂的皮肤附属器官，一生不断经历生长期、退行期和休止期的周期性循环。真皮乳头对诱导和维持毛囊的周期性循环必不可少，其大小决定了毛囊的大小和生长期的长短。毛乳头细胞具有确定和维持毛母质细胞增殖分化的作用，而毛球部毛母质细胞的增殖分化是毛囊周期性生长调控的关键。与其他组织器官的再生一样，上皮细胞与相应间质细胞间的相互作用在毛囊的周期性生长调控中具有重要意义。毛乳头细胞能分泌多种生长因子和细胞因子，如胰岛素样生长因子(IGF)-1、成纤维细胞生长因子(FGF)-7、肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、IL-6等。这些因子在毛囊上皮细胞与间质细胞间形成复杂有序的信号网络，调节毛囊周期。研究发现VEGF能作用于毛囊，在毛囊的周期性循环和毛发生长中起着重要作用。而抗VEGF的中和性抗体可以阻断重组VEGF和毛乳头起源的VEGF的活性，从而证实VEGF是毛乳头细胞的一种自分泌生长因子。目前认为VEGF调控毛囊生长的机制主要在以下两方面：(一)促进毛乳头细胞的增殖和迁移研究发现，在体外培养的鼠触须毛乳头细胞中加入不同浓度的VEGF，发现VEGF可以明显促进毛乳头细胞的增殖和迁移，且其最大活性是碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的2倍。VEGF可能是通过促进毛乳头细胞的增殖和迁移而调控毛囊的周期性循环和促进毛发生长。(二)诱导毛囊周围的血管形成毛囊的周期性循环伴随着毛囊周围血管的相应变化，在毛发生长早期毛囊周围有大量血管形成，而至退行期和休止期血管则发生明显退化。研究发现，毛囊周围暂时性的血管生成与毛囊外根鞘的角质形成细胞中VEGF mRNA表达上调有关。用转基因方法使外根鞘角质形成细胞过度表达VEGF能强烈诱导毛囊周围血管形成，从而加速脱毛后毛发再生，并能使毛囊增大、毛干增粗。相反，系统应用中和性抗VEGF抗体则导致毛发生长迟缓、毛囊减小。人们使用天然植物的历史源远流长，临床上传统中草药治疗脱发有大量方剂，是研究中草药治疗脱发的重要资源。本研究从传统中草药配方中选择常用的黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物等植物成分，从器官、细胞及分子水平研究它们对体外培养的人毛乳头细胞增殖、分泌VEGF和对体外培养的人毛囊生长的影响。本课题的研究主要包括以下两方面：(一)黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物等对体外培养的人毛乳头细胞增殖和分泌VEGF的影响采用两步酶消化法分离纯化毛乳头细胞，贴壁后1天细胞开始迁出呈放射性生长，2周后细胞绝大部分融合，取第4代细胞用于实验，选择不同浓度黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物等中药成分作用于体外培养的人毛乳头细胞72h，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖活性，ELISA法检测上清中VEGF蛋白含量。结果显示黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物对毛乳头细胞增殖均无明显促进作用；当黄芩苷浓度大于60.0μg／mL、齐墩果酸浓度大于50.0μg／mL、甘草提取物浓度大于30.0μg／mL时抑制毛乳头细胞增殖。与阴性对照组相比，黄芩苷浓度为3.75、7.5、15.0、30.0μg／mL、甘草提取物浓度为2.5、5.0、10.0、15.0ug／mL时，能促进细胞分泌VEGF，差异具有显著性；实验未发现齐墩果酸有促进毛乳头细胞分泌VEGF的作用。由此我们推测黄芩苷、甘草提取物能显著促进毛乳头细胞产生VEGF，并可能通过此途径促进毛发生长。(二)采用体外培养的人毛囊模型，观察黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物等对毛囊生长的影响采用人毛囊体外培养模型，通过显微镜下测量人毛囊生长长度并观察毛球部形态学改变，评价黄芩苷、齐墩果酸及甘草提取物等对毛发生长的影响。结果显示：与阴性对照组比较，黄芩苷浓度为7.5μg／mL、15.0μg／mL、30.0μg／mL、45.0μg／mL，齐墩果酸浓度为20.0μg／mL、30.0μg／mL、40.0μg／mL时能显著促进毛囊生长(P＜0.05)，其中齐墩果酸的促生长作用更显著，与阳性对照物米诺地尔相当。显微镜下观察发现，这些组的毛囊毛球部于培养第8天仍然呈现生长期样形态，而阴性对照组毛囊已发生退行性改变，真皮鞘和外毛根鞘变薄，毛球部萎缩，毛母质远离毛乳头，毛乳头变小或者消失。实验未发现甘草提取物对体外培养的人毛囊生长具有促进作用。由此我们初步认为黄芩苷、齐墩果酸对体外培养的人毛囊生长具有明显促进作用，能够延长毛囊的生长期，结合细胞实验，黄芩苷可能是部分通过促进毛乳头细胞分泌VEGF来促进毛发生长；而齐墩果酸可能通过其他途径来促进毛发生长。