金雀异黄素对多囊卵巢综合征大鼠的调节作用研究

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目的:通过检测、观察金雀异黄素(genistein, Gen)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)高雄血症大鼠的卵巢和子宫形态、血清各激素的作用确定GEN对PCOS高雄激素血症大鼠的治疗作用;检测大鼠子宫和卵巢P450芳香化酶的表达情况,揭示GEN对PCOS高雄激素血症大鼠治疗作用的可能作用机制。方法:按照胰岛素(INS)联合HCG造模法建立PCOS实验动物模型,分为阴性对照组(control group,CG)、模型组(model group,MG)、Gen低(low dose Gen group,L-Gen)、中(middle dose Gen group,M-Gen)、高剂量组(high dose Gen group,H-Gen)及雌激素阳性对照组(estrogen group,EG),剂量组分别灌胃给予Gen5、10、20mg/(kg·bw·d),雌激素组给予己烯雌酚0.5mg/kg,持续15d,观察动情周期10d。末次给药后,各组大鼠禁食12h,不禁水,用电子天平称重后,腹主动脉取血,用于ELISA方法检测激素水平;剥离大鼠卵巢和子宫,一侧卵巢固定、HE染色、切片,用于电镜观察,另一侧卵巢和子宫液氮保存,用于RT-PCR方法检测P450芳香化酶表达情况测定。结果:(1)建模试验中大鼠连续阴道上皮细胞涂片两个性周期(共10天,每个周期5天),模型组阴道角化细胞持续出现。模型组与空白对照组相比,体重略有下降,但不明显。(2)与模型组相比,中、高剂量组及雌激素组大鼠血清P水平上升,差异极显著(P<0.01)。低剂量组大鼠血清T水平下降,差异显著(P<0.05);中、高剂量组和雌激素组T水平下降,差异极显著(P<0.01)。与模型组相比,各剂量组大鼠血清SHBG水平均增高,差异极显著(P<0.01)。各剂量组大鼠血清中LH水平均下降,差异极显著(P<0.01);各剂量组FSH水平增高,其中高剂量组和雌激素组增高明显,差异极显著(P<0.01);各剂量组LH/FSH比值呈下降趋势,其中中、高剂量组和雌激素组下降明显,差异极显著(P<0.01)。(3)与模型组相比,各剂量组大鼠卵巢面积和体积均下降,雌激素组下降明显,差异显著(p<0.05)。与模型组相比,中、高剂量组大鼠的子宫/体比升高明显,差异有显著性(p<0.05),雌激素组卵巢/体比下降明显,差异有显著性(p<0.05)。镜下观察可见,模型组大鼠子卵巢出现PCOS病征的形态改变,证实试验造模成功;剂量组大鼠卵巢形态学发生了改变,尤其是高剂量组(20mg/kg bw)改变明显,与模型对照组相比,高剂量GEN组大鼠卵巢卵泡膜细胞层较模型对照组变薄,颗粒细胞层数明显增多,形态完整,排列较整齐,黄体组织数量亦增多,成熟卵泡居多,囊肿卵泡极少。(4)与模型组相比,雌激素组与高剂量组PCOS大鼠子宫及卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶表达水平明显降低。与模型组相比,中剂量组与低剂量组PCOS大鼠子宫以及卵巢组织中细胞色素P450芳香化酶表达水平差异不明显。结论:(1)金雀异黄素对PCOS可起到一定的治疗作用。(2)P450芳香化酶可能在PCOS疾病的发生发展中有着重要的作用,可以为研究PCOS疾病的病理机制提供新的方向和线索。
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