脑卒中后抑郁(Post-stroke depression, PSD)是指脑卒中后并发的抑郁,为最常见的脑血管病并发症。以脑卒中发生后出现的情绪低落、兴趣减退、易疲劳、思维迟缓、食欲减退、悲观绝望,甚则出现自杀企图和行为异常等为主要临床表现。目前对PSD发病机制的认识尚未统一,越来越多的学者认为PSD的发病机制是建立在脑卒中基础上的、多因素介导的神经生物学机制和社会心理学机制共同参与的结果。PSD药物治疗,主要是5-HT再摄取抑制剂(SSRI)、三环类药物(TCA)、NE再摄取抑制剂、单胺氧化酶抑制剂等,但都不同程度存在着选择性强、耐受性差、价格昂贵等缺点,难以达到满意疗效。PSD多为老年人,耐受性较差,治疗更要遵循疗效确切、起效快、低副作用的原则。中医药治疗精神情志疾患传统悠久,且具有多方位、多靶点效应、整体调节和毒副作用小的优势。中医辨证论治,既能治疗原发病中风,也能改善中风后的抑郁状态,二者兼顾,使其在本病的防治方面显示了良好的疗效。导师董梦久教授结合自己多年从事中西医结合防治脑病的临床经验,认为脑卒中后抑郁的病机特点主要为肝气郁滞、痰瘀互结、元神失用。治疗以逍遥散为基本方,酌加川芎、石菖蒲、郁金、葛根等,组成新方畅郁逍遥散,具有畅郁舒肝、化瘀涤痰、醒神开窍功效,体现了辨证与辨病相结合,临床研究中显示了对轻中度脑卒中后抑郁患者有较好疗效。本课题拟从动物实验角度研究畅郁逍遥散对小鼠行为学、神经递质、神经营养因子、基因等方面的影响,探讨脑卒中后抑郁的发病机制及中医药抗抑郁作用的机理,为PSD的临床治疗提供理论依据和参考。实验一为畅郁逍遥散对PSD小鼠其行为学的影响。在本实验过程中,复合处理制备脑卒中后抑郁小鼠模型,即采用双侧颈总动脉线栓再灌注法制备脑缺血小鼠模型,并在此基础上,给予孤养和慢性不可预知的温和应激法联合制备PSD模型。以脑缺血为内在病理变化,以慢性不可预测性长期温和的应激和孤养为外在因素,最大限度的模拟人类卒中后抑郁发生的各种内外因素,使之符合脑卒中后抑郁临床发病特点。行为学研究中观测到,造模各组小鼠术后1～2周均开始出现明显抑郁症状,表现为兴趣快感缺乏、蜷缩不动,易绝望,易激惹,体重明显减轻。糖水消耗量等实验也证明了造模的成功。实验发现中药复方畅郁逍遥散各剂量能够明显改善PSD小鼠的抑郁症状,增加PSD小鼠体重,增加小鼠糖水消耗量,缩短PSD小鼠游泳不动时间及悬尾不动时间。效果与百优解接近(强迫游泳悬尾实验),某些指标上甚至表现更为优越(体重和糖水消耗实验)。实验二为单胺类神经递质5-HT、NE、DA的测试,旨在探讨PSD小鼠模型脑内单胺类神经递质的变化,并观察畅郁逍遥散对PSD模型小鼠脑内单胺递小鼠影响。动物处理及模型制备同实验一,行为学实验结束后,将各组小鼠断头取脑,冰台上分离出额叶皮层、海马,放入-80℃冰箱保存,采用荧光分光光度法检测小鼠额叶皮质和小鼠的单胺类递质的含量。结果造模各组单胺类递质均较正常组急剧减少,提示我们单胺类递质5-HT、NE、DA等的含量明显减少与脑卒中后抑郁的发生有很大关系。同时,中药复方畅郁逍遥散可以显著提高PSD小鼠脑内NE、5-HT、DA等单胺类递质水平质,尤其是对PSD小鼠海马部位的NE和DA含量影响更为明显,甚至超出正常组水平,提示我们这可能是中药畅郁散畅郁逍遥散治疗脑卒中后抑郁患者临床产生疗效的机理之一实验三为畅郁逍遥散对卒中后抑郁小鼠BDNF、GFAP等神经营养因子的影响。动物处理及模型制备同实验一,将PSD小鼠模型在实验完成时进行水合氯醛、多聚甲醛心脏灌注并固定,用常规梯度酒精脱水及二甲苯透明后,浸蜡,进行石蜡包埋,备石蜡切片进行HE、免疫组化及原位杂交检测。实验发现,PSD小鼠存在明显的BDNF、GFAP等神经营养因子表达下降,经抗抑郁药物干预后表达明显增强,进一步证实了脑卒中后抑郁的发病与BDNF、GFAP等神经营养因子表达有着密切关系。中药复方畅郁散临床抗抑郁作用机理可能与是通过增强脑卒中后抑郁患者脑额叶皮质、海马等多部位BDNF、GFAP等神经营养因子的表达,实验四为畅郁逍遥散对PSD小鼠c-fos、TH基因表达的影响。动物模型制备同实验一,样品制备同实验二。实验中发现,PSD小鼠存在明显c-fos表达的增高,TH表达水平的降低,经抗抑郁药物干预后,c-fos表达下调而TH表达水平则表现出明显上调,提示脑卒中后抑郁的发生与c-fos、TH等基因表达水平有很大关系。中药复方畅郁散能够迅速抑制c-fos表达,增强TH基因的表达,并且中药两个剂量组TH表达水平均接近或超过了正常组,提示我们中药抗抑郁作用可能与影响c-fos、TH基因表达等有很大关系,推测中药临床治疗机理可能是通过抑制c-fos等立早基因,刺激单胺类神经递质NE和DA合成酶TH的基因表达,升高了脑卒中后抑郁患者脑内单胺类递质的含量,从而达到了治疗效果。