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本研究以一寄生在菩提树树干上的双孢田头菇菌株Ag09为研究对象,详细考察了该菌寄生于菩提树并对宿主所造成的影响,对其生物学特征、系统发育地位、菌丝体生长的营养条件等进行了研究。研究结果表明:
该菌具大型子实体,大多数担子上有2个孢子,双孢比例为93.8％,3孢3.65％,1孢为2.4％,4孢低于0.15％,双孢比例占绝对优势；单孢菌丝上有锁状联合,荧光染色孢子内含4个核。单孢菌株能在琼脂培养基上15天完成生活史,可作为菌物学研究的模式生物种。Ag09菌株的生活史类型不同于次级同宗结合和异宗结合两种类型,是一种新的性遗传模式。该菌株经形态学鉴定为双孢田头菇(Agrocybe cylindracea),分类地位为担子菌门Basidiomycota,伞菌亚门Agaricomycotina,伞菌纲Agaricomycetes,伞菌亚纲Agaricomycetidae,伞菌目Agaricales,球盖菇科Strophariaceae,田头菇属Agrocybe。
该菌的孢子通过伤口侵入宿主,在宿主体内萌发、生长繁殖出大量菌丝,危害宿主。从植株外观上看染菌植株树叶提前50-60天变黄,提前30-40天全部落叶。染菌植株整体树叶泛黄、凋敝,生长势明显弱于正常植株。以健康植株为对照比较染菌植株的叶绿素含量和光合放氧能力,病叶的叶绿素含量为2.56 mg/g,健康树叶的含量为3.94 mg/g,病叶片叶绿素含量仅为健康叶片的64.9％。病叶光合放氧量为9.24mmol O2.h-1.g-1,健康叶片为15.13mmolO2-h-1.g-1,病叶片光合放氧量为健康叶片的61.0％,被寄生的植株生长势减弱,最终衰亡。
Ag09菌株的ITS区序列长度为605bp,GC含量为48.1％。将序列提交Genbank获得登录号HQ619843,与其4个单孢菌株进行序列对比,序列相似度为99％,4个单孢菌株ITS区序列提交Genbank,获得登录号HM437169～HM437172。Blastn比对后,Ag09菌株的ITS序列和田头菇属真菌(Agrocybe spp.)具有高度的相似性。特别和A.aegerita(=Agrocybecylindracea,AY763670.1)同源性达到99％。从分子水平上印证了形态学上鉴定结论。
用单因子试验对Ag09菌株的碳源、氮源、温度、pH等培养条件分别进行了试验,结果表明菌丝体生长的最佳碳源为可溶性淀粉,柠檬酸最差,优劣顺序为可溶性淀粉>蔗糖>葡萄糖>乳糖>纤维素钠>麦芽糖>甲醇>柠檬酸；最佳氮源为蛋白陈,最差尿素,优劣顺序为蛋白陈〉酵母粉〉(NH4)2CO3〉(NH4)2SO4〉NH4NO3〉尿素；菌丝生长的pH范围为5.5-7.5,最适pH为7；适合温度为15℃-12.25℃,最适温度为25℃。