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乳腺癌是全世界女性最常见的恶性肿瘤之一,严重威胁妇女的身心健康,已成为当前社会的重大公共卫生问题。流行病学人群研究普遍认为,乳腺癌的发生和发展是由一系列基因、环境和生殖因素共同作用所导致的结果。长链非编码RNA(long noncoding RNAs,lnc RNAs)是一类长度超过200 nt、缺少开放阅读框、不参与或很少参与蛋白质编码的非编码RNA分子。最新研究结果显示多种lncRNA与乳腺癌的发生、发展密切相关。HOTAIR在乳腺癌细胞中的高表达与乳腺癌转移和预后相关。H19在乳腺癌中具有原癌活性,可促进乳腺瘤发展。SRA在乳腺癌细胞中高表达,并可对雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的表达发挥重要调控作用,从而对乳腺癌细胞的增殖和凋亡产生影响。lncRNA作为新一代生物标志物,其遗传多态性可能通过改变基因结构或生物学功能,对个体的肿瘤易感性产生影响。然而目前关于lncRNA与乳腺癌遗传易感性的关联研究尚未见在中国人群中报道。因此,lncRNA作为目前生命科学研究的热点,其遗传多态性在个体乳腺癌易感性研究上也存在着巨大的潜力。目的在中国人群中探讨乳腺癌相关lncRNA单核苷酸多态性(HOTAIR rs1899663C>A、rs4759314G>A和rs920778G>A,H19 rs3741219T>C和rs217727C>T,SRA rs10463297 T>C和rs801460G>A)与乳腺癌遗传易感性的关联,同时分析lncRNA SNPs与生殖因素间的交互作用。对研究中发现的有意义位点进行功能实验验证,探索发现新的乳腺癌遗传易感基因,为乳腺癌早发现、早诊断提供新的肿瘤生物标志物,也为乳腺癌高发风险评估开辟新途径。方法(1)结合国内外lncRNA数据库,通过标签SNP预测软件筛选HOTAIR、H19和SRA上的标签SNPs。(2)本研究采用病例-对照研究方法。在中国河南汉族女性人群中,以医院来源选取新发乳腺癌病例502例,按年龄进行频数匹配后,以社区为来源选取健康女性对照504例。HOTAIR rs1899663和rs4759314、H19 rs3741219和SRA rs10463297等四个SNP位点采用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(PCR-RFLP)技术进行基因型检测。HOTAIR rs920778、H19 rs217727和SRA rs801460等三个SNP位点采用创造性酶切位点CRS-PCR方法进行基因型检测。通过spss21.0软件进行t-检验和χ2检验方法,比较病例组和对照组之间年龄、生殖因素和乳腺癌家族史等因素的差异。应用统计分析软件sas9.1,采用多因素非条件logistic回归模型对生殖因素调整后分析病例组和对照组之间各基因型分布的差异。同时计算假阳性报告率,判断遗传变异与乳腺癌间是否存在真实关联。应用hardy-weinberg软件分析对照组人群基因型分布是否符合hardy-weinberg平衡。应用shesis在线软件进行单体型分析。应用mdr(multifactordimensionalityreduction)软件分析乳腺癌基因-生殖因素交互作用。(3)采用qrt-pcr方法检测正常人群中有意义位点srars10463297不同基因型的血清中sramrna表达量,进而判断srars10463297遗传变异是否对sramrna表达产生影响。结果(1)hotairrs1899663gt+tt基因型在初潮年龄>14岁的女性中(or:0.42,95%ci:0.21-0.82)和怀孕次数>2的女性中(or:0.65;95%ci:0.49,0.95)可降低乳腺癌的发病风险。在绝经年龄≤50岁的女性中rs4759314ag+gg基因型乳腺癌发病风险较低(or:0.97,95%ci:0.84-0.99)。hotairrs920778t等位基因携带者可显著增加乳腺癌的发病风险(or:1.41,95%ci:1.13-1.75)。单体型分析结果显示hotairgrs1899663ars4759314trs920778单体型可显著增加乳腺癌的发病风险(or:1.22,95%ci:1.01-1.45)。(2)h19rs217727ct基因型可降低乳腺癌的发病风险(or:0.64,95%ci:0.47-0.87)。rs217727ct+tt基因型在怀孕次数>2的女性中可降低乳腺癌的发病风险(or:0.79,95%ci:0.55-0.97)。(3)srars10463297tc基因型(or:1.43,95%ci:1.02-2.00)和tc+cc基因型(or:1.39,95%ci:1.01-1.92)可显著增加乳腺癌的发病风险。rs10463297tc+cc基因型在年龄大于50岁女性中(or:1.79,95%ci:1.05-3.05)与乳腺癌发病风险增加相关。rs217727tc(or:2.45,95%ci:1.44-4.17)和tc+cc基因型(or:2.24,95%ci:1.34-3.69),rs801460ga(or:1.92,95%ci:1.17-3.14)、aa(or:2.25,95%ci:1.23-4.13)和ga+aa基因型(or:1.99,95%ci:1.25-3.19)均与乳腺癌er阳性相关。rs10463297tc(2.09±0.41)、cc(2.42±0.51)和tc+cc(2.20±0.47)基因型中sramrna的表达量均高于rs10463297tt(1.45±0.34)基因型(p<0.05),且随着rs10463297突变位点个数的增加,sramrna表达量呈现增加的趋势(ptrend=0.001)。(4)基因-生殖因素交互作用分析结果显示携带rs920778位点T等位基因、rs10463297位点C等位基因、已绝经和有乳腺癌家族史的“高危”人群患乳腺癌的风险是非上述组合的“低危”人群的2.35倍(OR:2.35,95%CI:1.59-3.38)。结论1、HOTAIR rs920778突变等位基因T、SRA rs10463297 TC和TC+CC基因型可能增加乳腺癌发病风险;H19 rs217727 CT基因型可降低乳腺癌的发病风险。2、HOTAIR基因单体型G rs1899663A rs4759314T rs920778可增加乳腺癌发病风险,而单体型T rs1899663A rs4759314C rs920778可以降低乳腺癌发病风险。3、H19 rs217727 CT基因型与乳腺癌ER阳性和HER-2阳性相关;SRA rs10463297 TC和TC+CC基因型,rs801460 GA、AA和GA+AA基因型与乳腺癌ER阳性相关。4、SRA rs10463297基因突变可调节SRA mRNA表达量。5、rs920778、rs10463297、已绝经和乳腺癌家族史在乳腺癌发生中具有交互作用。