背景原发性肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)是我国非常常见的恶性肿瘤,恶性程度比较高,起病隐匿,不易被早期发现,较早就可以发生肝内转移,预后较差。我国是“肝炎大国”,乙、丙型肝炎病毒的感染是我国原发性肝细胞癌发病率较高的最主要病因,这就造成我国原发性肝细胞癌的发病常具有病毒性肝炎、肝硬化和肝癌三步曲[1]。AFP作为原发性肝细胞癌的特异性肿瘤标志物,对于肿瘤的诊断有重要作用,其与影像学检查结合对于原发性肝细胞癌的诊断有重要的参考价值,但是,并不是所有的原发性肝细胞癌的AFP均升高,而且AFP的升高也并不一定都意味着肿瘤。原发性肝细胞癌的治疗方法有很多种,最常用的治疗手段仍然是肝切除手术[2],目前随着肝脏外科技术的日益发展,肝移植已经成为治疗原发性肝细胞癌的重要方法,使患者的预后得到了明显改善[3]。但是,由于经济、区域性、医疗资源发展及分布不平衡等多方面原因,使绝大多数原发性肝细胞癌患者就诊的同时,已经失去了根治性切除及肝移植的机会[4]。特别是对于AFP阴性的原发性肝细胞癌患者,由于不容易做到早期发现,使该类患者更容易丧失手术治疗的机会,严重影响患者的预后。因此,寻找除AFP之外的诊断指标,特别对于AFP阴性的原发性肝细胞癌患者的辅助诊断至关重要[5]。MMP9是基质金属蛋白酶中的一个重要成员,多项资料表明,MMP9在肿瘤组织中的表达明显增加,且在已经发生转移的肿瘤组织中的表达量更高[6]。MMP9不仅在降解细胞外基质中发挥着重要作用,而且还可以降解基底膜中的IV型胶原纤维,这与肿瘤的侵袭及转移密切相关[7]。PTEN是一个非常重要的抑癌基因,在多种肿瘤中的表达量明显下降,其具有的双重磷酸酶活性是发挥肿瘤抑制功能的基础。PTEN产物通过特定的磷酸化作用,不仅可以诱导细胞的凋亡,还能够抑制肿瘤血管的生成、促进肿瘤细胞与周围黏附,从而发挥其对肿瘤的抑制作用[8]。肿瘤的发生及转移,必然伴有细胞外基质的降解、细胞凋亡障碍、血管基底膜的破坏及新生血管增多等改变,从而使肿瘤细胞凋亡减少,对周围的侵袭能力增强[9]。目的本实验通过对AFP阴性的原发性肝细胞癌组织、肝硬化组织及正常肝脏组织中的PTEN及MMP9进行染色和分析,从而发现其在三组之间表达量的差异,进而对AFP阴性原发性肝细胞癌患者的诊断提供帮助。方法1.选取郑州大学第一附属医院2014年6月至2015年8月术前血清学检查AFP阴性,术后病理结果证实为肝细胞癌的患者30名,取其肿瘤标本,另分别取30名肝硬化组织、正常肝脏组织标本作为对照;2.运用免疫组织化学方法对AFP阴性的原发性肝细胞癌、肝硬化及正常肝脏组织标本中的MMP9及PTEN进行染色;3.运用统计学方法对AFP阴性的原发性肝细胞癌、肝硬化及正常肝脏标本中MMP9及PTEN的实验结果进行分析;4.根据统计学分析的结果,得出相应结论。结果免疫组织化学结果显示MMP9及PTEN在三组标本中表达的阳性率有所不同,MMP9在AFP阴性的原发性肝细胞癌中表达的阳性率为90.0%,肝硬化组织中的表达阳性率为16.7%,正常组织中的表达阳性率为10%,三组之间比较χ~2=49.745,P<0.001,差异具有统计学意义。PTEN在AFP阴性的原发性肝细胞癌中表达的阳性率为10%,肝硬化组织中的表达阳性率为80%,正常组织中的表达阳性率为86.7%,三组之间比较χ~2=44.702,P<0.001,差异具有统计学意义。PTEN及MMP9在AFP阴性原发性肝细胞癌中的关联性分析,χ~2=5.926,P=0.015,r=0.406。结论1.MMP9在AFP阴性的原发性肝细胞癌组织中的表达高于肝硬化及正常肝脏组织;2.PTEN在AFP阴性的原发性肝细胞癌组织中的表达低于肝硬化及正常肝脏组织;3.MMP9及PTEN在AFP阴性的原发性肝细胞癌中的表达有一定的关联性;4.MMP9及PTEN有望成为AFP阴性的原发性肝细胞癌患者的临床辅助诊断指标。