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目的观察石斛合剂(DC)对过氧化氢(H202)诱导的人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)氧化损伤的作用,探讨石斛合剂的保护作用及其可能机制。方法过氧化氢诱导处理SH-SY5Y细胞,分成5组,正常组、模型组、5%DC组、10%DC组、15%DC组。MTT法检测细胞活力、细胞外LDH漏出量及细胞内MDA、SOD和GSH水平；流式细胞术检测细胞凋亡率及线粒体膜电位变化；DAPI染色观察各组细胞核形态学变化；WB检测bax、bcl-2、caspase3蛋白表达水平；qPCR检测caspase3基因表达水平。结果(1)MTT检测细胞活力,过氧化氢处理细胞1小时后,与正常组比较,其余各组细胞活力明显下降(P<0.05或P<0.01),石斛合剂各组细胞活力明显升高(P<0.05或P<0.01)。(2)细胞经H202损伤后细胞膜通透性增加,LDH漏出率及细胞内MDA含量显著增加(P<0.01),SOD和GSH显著降低(P<0.01)；经石斛合剂处理后,LDH漏出率和细胞内MDA含量显著降低(P<0.01),SOD和GSH活力增高明显(P<0.01或P<0.05)。(3)细胞经处理后,以AnnexinV-FITC/PI双染后上流式细胞仪检测,与正常组比较,’模型组细胞的凋亡率明显升高(P<0.01),而石斛合剂各组的细胞凋亡率降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。JC-1染色观察MMP变化,与正常组比较,H2O2组细胞绿／红荧光强度比值显著增加(P<0.01),经石斛合剂干预后,细胞绿／红荧光强度比值显著降低(P<0.01)。DAPI染色后,在荧光显微镜下发现正常组细胞核染色均匀,核圆形或椭圆形,H202组细胞胞核内可见致密的颗粒状荧光,呈现出凋亡细胞典型的核固缩、核断裂表现：石斛合剂各组细胞核形态趋于正常,凋亡细胞数量明显减少。(4)’WB检测结果发现,氧化损伤后SH-SY5Y细胞bcl-2低表达但Bax、caspase3高表达,Bax/bcl-2比值升高,石斛合剂各组有效抑制了H202的作用,使Bax/bcl-2比值及caspase3表达降低。(5) qPCR分析显示,H202组细胞caspase3 mRNA表达明显增加,经石斛合剂处理后逆转上述基因的表达,从而达到抗凋亡的作用。结论(1) 400umol/L H2O2诱导损伤1h能显著降低SH-SY5Y细胞的活力,并诱导细胞出现凋亡,可作为神经退行性疾病的细胞模型。(2)石斛合剂可减少LDH的漏出量和MDA的含量,提高SOD和GSH水平,稳定MMP,其中以10%和15%DC组效果最佳。(3)石斛合剂能降低氧化损伤细胞的凋亡率与其下调H202损伤细胞的Bax/Bcl-2比值,caspase-3蛋白及其基因表达有关。