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【目的】趋化因子受体7(CCR7)在细胞定向运动中发挥重要作用,并在多种癌细胞中高度表达,与淋巴转移密切相关。本课题组前期研究发现:炎性因子TNF-α可以促进胆囊癌(GBC)肿瘤进展,并通过促微淋巴管形成而促进胆囊癌淋巴转移。在胆囊癌中,可能存在着“TNF-α促进胆囊癌细胞CCR7表达,进而趋使胆囊癌细胞向淋巴管侵入”的促淋巴转移机制。因此,本课题将围绕这一问题开展研究。【方法】用免疫组织化学方法(IHC)检测胆囊癌组织和癌旁组织CCR7表达,分析CCR7表达与临床病理因素之间的关系及与胆汁TNF-α水平之间的关系。用不同浓度的TNF-α干预两种胆囊癌细胞株(NOZ细胞和SGC-996细胞),westernblot检测胆囊癌细胞CCR7的表达。构建稳定沉默表达CCR7 sh RNA慢病毒载体胆囊癌细胞株LV-sh CCR7 NOZ和LV-sh CCR7 SGC-996,并用Westernblot检测CCR7的沉默表达效应。通过transwell实验和动物实验进一步验证TNF-α-CCR7轴在胆囊癌细胞向淋巴系统迁移中的作用。【结果】免疫组化结果显示,胆囊癌组织中CCR7阳性表达率90.47%(38/42)显著高于癌旁组织22.7%(5/22)(P<0.05)。胆囊癌AJCC分期中Ⅱb-Ⅳ期癌组织CCR7强阳性表达率显著高于Ⅰ-Ⅱa期癌组织【75.0%(19/25)vs 35.3%(6/17)】(P<0.05);有淋巴结转移的胆囊癌CCR7强阳性表达率显著高于无淋巴结转移的胆囊癌【79.2%(19/24)vs 33.3%(6/18)】(P<0.05),表明胆囊癌组织CCR7表达与胆囊癌AJCC分期及淋巴转移正相关。胆囊癌组织CCR7强阳性表达患者胆汁中TNF-α水平显著高于CCR7中度以下表达患者(657.1±45.49 pg/ml vs 416.6±54.14pg/ml)(P<0.05)。Westernblot检测结果示,TNF-α刺激胆囊癌细胞后,CCR7表达量上调,并呈时间和浓度依耐性;当TNF-α的刺激浓度在10ng/ml-20ng/ml时,胆囊癌细胞CCR7表达量显著高于对照组(p<0.05)。Transwell侵袭小室实验示:TNF-α可以促进胆囊癌细胞侵袭迁移至淋巴管内皮细胞处(HDLECs);胆囊癌细胞CCR7干扰沉默后,TNF-α促进胆囊癌细胞侵袭迁移至HDLECs效果减弱。动物实验结果显示,裸鼠胆囊原位种植NOZ细胞组中TNF-α干预组淋巴转移(12/12)较生理盐水对照组(7/12)明显增高,差异有显著性(P<0.05);裸鼠胆囊原位种植LV-sh CCR7 NOZ细胞组中,TNF-α干预组淋巴转移(4/12)较生理盐水对照组淋巴转移(2/12)差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】1.趋化因子受体CCR7在胆囊癌组织中高度表达,且表达水平与胆汁中TNF-α水平、胆囊癌AJCC分期及淋巴转移正相关;2.TNF-α可以促进胆囊癌细胞CCR7表达,并呈时间和浓度依耐性;3.TNF-α可以通过CCR7促进胆囊癌细胞迁移到淋巴内皮细胞进而促进淋巴转移。