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肠炎沙门氏菌(Salmonella enterica Serovar Enteritidis,SE),是引起食源性沙门氏菌病最常见的病原菌,可引起人和禽类肠道或全身性疾病。AI-2/LuxS群体感应系统广泛存在于革兰氏阴性和阳性菌中,通过调控病原菌的毒力基因表达、生物被膜形成和药物敏感性等来实现对病原菌的调控。尽管沙门氏菌中已鉴定出AI-2/LuxS系统,但其对SE生物学特性的影响还不清楚。因此,本论文通过构建AI-2/LuxS系统关键基因luxS缺失株,研究了该系统对SE生长特性、生物被膜形成能力、黏附侵袭能力及药物敏感性等的影响,初步探究了AI-2/LuxS系统对SE生物学特性的影响。本研究利用Red同源重组系统成功构建luxS缺失株。随后将包含luxS-ORF及其可能的启动子区域基因片段,克隆至pWKS30,电转入luxS突变株,成功获得互补株C-SM32ΔluxS。为了研究LuxS系统对SE生物学特性的影响,分析了ΔluxS基因的稳定性,并比较了亲本株和luxS突变株的体外生长速率、生物被膜形成能力及药物敏感性等。缺失株在无抗性平板上连续传代25代,缺失基因未发生回复,表明luxS缺失株能够稳定遗传缺失的ΔluxS基因;通过测定不同时间点的生长曲线,发现luxS缺失株体外生长速率略快于亲本株。利用96孔板定量检测了菌株在24h,48h和72h的生物被膜,并通过激光共聚焦显微镜观察了生物被膜的结构,结果显示,亲本株和缺失株生物被膜形成能力随时间增加而增强,相同时间内缺失株生物被膜形成能力显著高于亲本株;激光共聚焦图像显示,亲本株生物被膜疏松不能聚集成团;而缺失株的生物被膜聚集成团且结构致密,其生物被膜形成能力明显强于亲本株。对生物被膜形成相关基因csgA、ompR、csgB、csgD的转录水平分析显示,与亲本株相比,ΔluxS缺失株的csgA、ompR转录水平明显上调,而csgB和csgD没有差异。黏附侵袭试验结果显示,缺失株对人结肠腺癌细胞Caco-2和DF-1细胞的黏附侵袭能力均显著高于亲本株。对毒力相关基因sopB、sseL、mgtC和fimA的转录水平测定显示,与亲本株相比,缺失株的sopB、sseL、mgtC和fimA转录水平均明显上调。表明LuxS系统影响肠炎沙门氏菌的黏附侵袭能力。此外,药物敏感性测试结果显示,与亲本株相比,除氨基糖苷类无变化外,突变株的敏感性均有不同程度的提高,对喹诺酮类的敏感性提高128-256倍,对氨苄西林提高8倍,四环素类提高2-4倍,氯霉素类提高4-8倍,说明LuxS系统影响SE对部分药物的药物敏感性。上述结果显示,luxS基因缺失不影响耐药肠炎沙门氏菌的生长活性,但引起其药物敏感性、生物被膜形成能力及对DF-1细胞和Caco-2细胞黏附侵袭能力的明显增加,这些结果为深入研究LuxS系统对肠炎沙门氏菌生物学特性的调控提供了参考数据。