泡沫分离提取螺旋藻小分子多肽及其活性研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shijianwu2003
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本研究利用超声波破碎法辅助提取螺旋藻蛋白,并与直接水提法进行了比较;对泡沫分离螺旋藻可溶性蛋白的提取物进行了紫外可见光扫描和基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱扫描,确定提取物主要为分子量在5000D以下的小分子多肽。采用单因素实验结合响应面设计及分析对泡沫分离螺旋藻小分子多肽工艺进行优化;利用葡聚糖凝胶G-25柱分离纯化螺旋藻小分子肽;对螺旋藻肽的抗氧化活性、体外降糖活性和抑菌性进行了研究。主要研究结果如下:1、利用泡沫分离法提取螺旋藻可溶性蛋白可以得到分子量范围大多在5000D的小分子多肽。在单因素实验的基础上进行三因素三水平(因素包括:pH、原液体积、通气时间)的响应面设计和分析得出最佳提取工艺为:气流速度100mL/min,原液浓度1g/L,原液pH值9.2,原液体积394mL,通气时间为15.5min,多肽提取率可达14.21%。2、利用葡聚糖凝胶G-25柱对螺旋藻小分子多肽提取物进行分离,主要是由4个组分组成,并测得各个组分分子量范围分别为11000D、3000D、1200D和550D附近。3、以Vc为对照,对螺旋藻小分子多肽各凝胶层析后的各个组分进行抗氧化活性研究。结果表明:只有分子量在3000D附近的螺旋藻小分子多肽组分具有还原能力,对2种自由基有不同程度清除作用。当其浓度为10mg/mL,还原能力达到Vc的81.7%;浓度6mg/mL,对超氧阴离子的清除率达到47.3%;浓度5mg/mL,对羟基自由基的清除率为87.93%。4、利用体外降糖测定了螺旋藻小分子多肽经凝胶层析分离后收集的各个组分对α-葡萄糖苷酶的抑制作用。只有分子量在550D附近的螺旋藻小分子多肽组分具有抑制作用。其对α-葡萄糖苷酶的半数抑制率为17.59mg/mL。5、利用滤纸片法测定螺旋藻小分子多肽对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有一定抑制作用,对蜡样芽胞杆菌、黑根霉和酿酒酵母没有抑制作用。
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