含Arg9的人源性抗HBsAg单链抗体/EGFP融合蛋白的基因构建、表达及内化活性的研究

来源 :第四军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xpank
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目的:构建带有转膜结构域Arg9的ScFv14/EGFP融合蛋白基因, 在大肠杆菌中进行表达,纯化,并对纯化产物的亲和活性和内化作用进行分析。 方法:设计引物将Arg9的编码序列分别引入ScFv14基因的5’端、EGFP基因的5’端和3’端,进行PCR扩增。将测序正确的ScFv14基因和R9/ScFv14基因分别与R9/EGFP、EGFP/R9和EGFP基因连接后克隆入原核表达载体pET32a,转化大肠杆菌BL21(DE3)LysS原核诱导表达,用Ni-NTA柱进行缚化后,用间接ELISA方法检测表达产物与HBsAg的亲和活性,并用间接免
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