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细胞外基质磷酸糖蛋白/成骨细胞/骨细胞因子45(Matrix ExtracellularPhosphoglycoprotEin/Osteoblast/Osteocyte Factor45，MEPE/OF45)自2000年被首次克隆以来，作为小型的N—端连接整合素的糖蛋白(Small Integrin—BindingLigand，N—linked Glycoprotein，SIBLING)家族的一员，它的功能研究就一直局限在调节骨代谢和磷(体内)平衡方面。
近年来，本实验室及其国外合作实验室的前期研究揭示了MEPE/OF45蛋白的新功能，即MEPE/OF45参与细胞DNA损伤应答；MEPE/OF45能够增强细胞对DNA损伤诱导剂(DNA Damage Inducers)的耐受性。本实验室在用基因表达谱芯片研究MEPE/OF45功能过程中还发现MEPE/OF45能够抑制细胞凋亡，并且MEPE/OF45的高表达伴随着SERPlNB2[Serine(or cysteine)proteinase inhibitor，clade type—2]及SERPINB2相关蛋白RB(retinoblastoma)的高表达。因此，研究三者之间可能的调控关系对揭示MEPE/OF45的抗辐射及抗凋亡功能具有重要意义。
在本研究中我们获得了以下的结果：(1)原核表达了SerpinB2基因、纯化了SERPINB2和MEPE/OF45的融合蛋白，并用纯化的蛋白免疫小鼠制备了抗SERPINB2和抗MEPE/OF45的多克隆抗体，用ELISA测定抗体的效价可达1：20000，Western印迹表明抗体的特异性较好；(2)构建了SerpinB2—siRNA载体，筛选得到2条SerpinB2—siRNA，可对293T细胞内源性SERPINB2的表达有抑制作用：(3)用瞬时转染过表达MEPE/OF45、microRNA抑制MEPE/OF45的表达及siRNA敲低SERPINB2的表达，研究了MEPE/OF45与SERPINB2和RB在蛋白水平的相互关系，发现MEPE/OF45、SERPINB2、RB蛋白表达水平具有一致性，有可能是MEPE/OF45影响凋亡的途径之一。该工作不仅有助于加深对细胞DNA损伤应答机制的认识，还可能为今后放射治疗的靶分子研究提供有意义的线索。