帕罗西汀预处理对SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

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目的:探讨帕罗西汀预处理对SD大鼠局部脑缺血再灌注损伤的保护作用及其可能机制,并与氟西汀比较保护作用是否有差别。方法:96只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、对照组、帕罗西汀组、氟西汀组(每组24只)。帕罗西汀组、氟西汀组于术前14天开始分别给予帕罗西汀混悬液、氟西汀混悬液(2.0mg/kg即10ml/kg)灌胃,1次/天;假手术组、对照组均于术前14天开始给予等容积0.9%的氯化钠溶液灌胃(10ml/kg),1次/天。对照组、帕罗西汀组及氟西汀组均采用改良Longa-Zea线栓法制备SD大鼠右侧大脑中动脉闭塞的脑缺血再灌注模型(假手术组仅暴露右侧颈总动脉、颈外动脉及颈内动脉,不做缺血再灌注)。各组再按缺血2h再灌注0h、2h、6h、24h分为4个亚组(每组6只)。通过Zea-Longa5分制评分标准进行神经功能缺损评分;2%氯化三苯四唑啉(TTC)染色并用图象分析系统测量脑梗死体积;HE染色观察脑组织病理形态;免疫组织化学法检测Caspase-3、IL-1β的表达;利用SPSS11.5统计分析软件进行统计学分析。结果:1.神经功能缺损评分:对照组较假手术组神经功能缺损症状明显,各相同再灌注时间点,差异具有统计学意义(p﹤0.01);帕罗西汀组较对照组神经功能缺损评分降低,再灌注24h,差异具有统计学意义(p﹤0.01);帕罗西汀组与氟西汀组神经功能缺损评分在缺血后各相同再灌注时间点比较差异均无统计学意义(p﹥0.05)。2.脑梗死体积比较:假手术组未见脑梗死灶;对照组、帕罗西汀组、氟西汀组均于缺血2h见到梗死灶,随再灌注时间延长,脑梗死体积逐渐增大,对照组于再灌注24h达高峰,帕罗西汀组、氟西汀组于再灌注6h达高峰;帕罗西汀组较对照组脑梗死体积减小,再灌注24h,差异具有统计学意义(p﹤0.01);帕罗西汀组脑梗死体积在缺血后各相同再灌注时间点与氟西汀组比较,差异均无统计学意义(p﹥0.05)。3. HE染色观察:假手术组双侧脑组织层次分明,神经细胞形态结构正常;对照组缺血侧缺血区脑组织排列紊乱,神经细胞皱缩,变性,组织间水肿,可见空泡化改变;各相同再灌注时间点,帕罗西汀组与对照组比较,缺血区变性、坏死的神经元数量减少,空泡样改变减轻,组织间水肿减轻;帕罗西汀组与氟西汀组比较,缺血区脑组织损伤程度在缺血后各相同再灌注时间点均未见明显差异。4. Caspase-3的表达:对照组、帕罗西汀组、氟西汀组在缺血2h可见少量Caspase-3阳性表达细胞,再灌注2h后Caspase-3阳性表达细胞数开始增加,至再灌注24h达高峰;对照组较假手术组Caspase-3阳性表达细胞数增多,再灌注2h、6h、24h,差异具有统计学意义(p﹤0.01);帕罗西汀组较对照组Caspase-3阳性表达细胞数减少,再灌注2h、6h、24h,差异具有统计学意义(p﹤0.05);帕罗西汀组Caspase-3阳性表达细胞数在缺血后各相同灌注时间点与氟西汀组比较,差别均无统计学意义(p﹥0.05)。5. IL-1β的表达:对照组、帕罗西汀组、氟西汀组在脑缺血2h可见少量IL-1β阳性表达细胞,再灌注2h后IL-1β阳性表达细胞数开始增加,至再灌注6h达高峰,随后逐渐下降;对照组较假手术组IL-1β阳性表达细胞数增多,再灌注2h、6h、24h,差异具有统计学意义(p﹤0.01);帕罗西汀组较对照组IL-1β阳性表达细胞数明显减少,再灌注6h、24h,差异具有统计学意义(p﹤0.05);帕罗西汀组IL-1β阳性表达细胞数在缺血后各相同灌注时间点与氟西汀组比较,差异均无统计学意义(p﹥0.05)。结论:1. Caspase-3、IL-1β的表达参与了脑缺血再灌注损伤的病理生理过程,加重脑损伤。2.帕罗西汀对脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,产生这种保护的机制可能与帕罗西汀减少Caspase-3及IL-1β的表达从而减轻脑缺血再灌注损伤过程中的细胞凋亡及炎症反应有关。3.帕罗西汀、氟西汀对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用没有明显差异。
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