论文部分内容阅读
背景及目的:肿瘤细胞存在的对化疗的耐药性,常常影响化疗药物的治疗效果。其耐药机理之一是由多药耐药基因(MDR-1)表达产物P-糖蛋白(P-giycoprotein , P-gp)增高而介导的多药耐药性(multi-drug resistance, MDR)的产生。近年来,多项研究发现,环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)可通过P-gp的介导与MDR之间存在关联,COX-2在肿瘤细胞MDR发生中的作用和机制日益受到关注。本研究以人胃腺癌细胞株BGC-823为研究对象,观察紫杉醇及COX-2选择性抑制剂塞来昔布对胃腺癌细胞株COX-2和P-gp表达的影响,通过比较单用紫杉醇及紫杉醇联合塞来昔布后BGC-823细胞凋亡的变化,了解COX-2抑制剂在逆转MDR中的作用,最终探讨COX-2在化疗药物诱发的肿瘤细胞MDR产生中的作用。方法:常规体外培养人胃腺癌细胞株BGC-823,细胞传代24h后进行药物处理;MTT法检测紫杉醇不同剂量、不同时间点及塞来昔布不同剂量对BGC-823细胞生长的影响,确定紫杉醇和塞来昔布的实验剂量;在此基础上采用Western blot方法检测一定剂量范围内某一时间点的紫杉醇对BGC-823 COX-2、P-gp蛋白表达的影响及联合塞来昔布后两种蛋白表达的变化情况;流式细胞仪PI单染法检测细胞周期的DNA含量,分析比较不同浓度的紫杉醇以及不同浓度紫杉醇联合非细胞毒浓度塞来昔布诱导BGC-823细胞的凋亡率。结果:紫杉醇对胃腺癌细胞株BGC-823的生长呈细胞毒作用,此作用具时间和剂量依赖性。在一定剂量范围内和某一时点,随着紫杉醇剂量逐渐升高,BGC-823细胞的COX-2、P-gp的表达均呈上升趋势;且这两种蛋白在紫杉醇联合塞来昔布应用后表达均随塞来昔布剂量增高呈下降趋势。紫杉醇联合塞来昔布介导的人胃腺癌细胞株BGC-823的细胞凋亡率显著高于单用紫杉醇组(P<0.01),塞来昔布可提高紫杉醇的细胞凋亡作用。结论:紫杉醇可诱导人胃腺癌细胞株BGC-823 COX-2及P-gp蛋白表达的同时增加,这种表达的增加能被塞来昔布所抑制;并且塞来昔布可提高由紫杉醇介导的BGC-823细胞的凋亡作用,此作用可能与塞来昔布下凋BGC-823细胞COX-2及P-gp蛋白表达水平有关。COX-2表达的诱导在紫杉醇诱导的P-gp表达中起着重要作用。