Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus type 1，HIV-1)包膜糖蛋白(glycoprotein，gp)由前体蛋白gp160进入高尔基复合体后被蛋白水解酶裂解成外膜糖蛋白gp120和跨膜糖蛋白gp41两部分，这两部分经非共价键结合，并形成异源三聚体结构。gp120含有与细胞表面受体结合的位点以及主要的中和表位，因而决定病毒对不同靶细胞的亲嗜性，并在引起细胞病变及诱导机体免疫反应方面发挥重要作用。gp41由膜外区、跨膜区和胞质区三个部分组成，其膜外区直接介导了病毒包膜与细胞膜的融合，使病毒内容物释放进入细胞。由于gp120和gp41参与病毒穿入靶细胞前的过程，因此是宿主抗病毒体液免疫反应的主要靶点，也是预防性HIV-1疫苗设计中的重要候选免疫原。为探讨env基因在哺乳细胞中高效表达条件，最终获得可溶性包膜蛋白，及进一步研究其生物学特性并为研制HIV-1包膜疫苗打下物质基础，本研究通过对HIV-1包膜糖蛋白基因进行修饰，去除跨膜区和胞质区截短gp41，同时突变gp120与gp41之间的蛋白酶水解位点，构建了HIV-1 ADA株包膜蛋白gp140的真核表达载体。另外，为了比较gp120与gp140免疫学特性的差异，同时也为后续进行包膜糖蛋白的修饰建立物质基础，本研究还分别克隆了HIV-1 ADA株和黑龙江省分离株CHNHLJBF03009包膜糖蛋白gp120基因，并构建其表达载体。通过将上述表达载体转染293T细胞，检测env表达情况，以探讨其在哺乳细胞中的高效表达条件。结果：(1)通过重叠延伸剪接法成功对HIV-1 ADA株包膜基因进行修饰，构建了HIV-1 ADA株包膜蛋白gp140的真核表达载体。(2)构建了HIV-1 ADA株和黑龙江省分离株CHNHLJBF03009包膜糖蛋白gp120的真核表达载体。(3)在转录水平上检测到HIV-1 env的表达。 由于在蛋白水平没有检测到env表达，因此在后续工作中将进一步通过修饰表达载体，进而采用在转录和翻译水平提高表达的策略，探讨env在哺乳细胞中表达的优化条件。本研究为最终获得可溶性包膜糖蛋白，及后续进行包膜糖蛋白的修饰奠定了物质和实验基础。