【摘 要】
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结直肠癌在我国的发病率居于常见恶性肿瘤中的第三位,死亡率居第五位,严重威胁着我国人民和世界人民的健康和生命。散发性结直肠癌发病的早期症状不明显,发病位置隐蔽,使得该
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结直肠癌在我国的发病率居于常见恶性肿瘤中的第三位,死亡率居第五位,严重威胁着我国人民和世界人民的健康和生命。散发性结直肠癌发病的早期症状不明显,发病位置隐蔽,使得该疾病的早期诊断十分困难。微小RNA (miRNA)是一类小分子量,非编码内源性的单链RNA序列,长度在20个核苷酸左右,在许多生物途径的基因表达调控中发挥重要作用。miRNA能够与靶mRNA3’UTR发生特异性结合抑制基因的翻译,从而调控该基因的转录以及表达,进而参与到细胞生长、分化发育、凋亡等生物学过程中。近年来的研究表明,miRNA靶位点的单核苷酸多态性会影响miRNA对靶mRNA表达的调控,与人类某些肿瘤包括结直肠癌的发生、发展紧密相关。本研究通过文献查询和生物信息学的方法筛选出三个散发性结直肠癌的候选基因(KRAS, PDCD4, MCC)以及作用于基因3’UTR多态性位点的靶miRNAs。目前关于散发性结直肠癌候选基因(KRAS, PDCD4, MCC)3’UTR与miRNAs之间关系的研究并未见报道。本课题通过构建候选基因3’UTR多态性位点野生和突变型的表达载体与靶miRNA共转染细胞,用双荧光素酶报告基因的方法分析基因与miRNA之间的靶标关系。结果表明当miR-3691-5p和miR-34b-5p分别与KRAS和PDCD4的双荧光素酶表达载体共转染细胞时,野生型表达载体的荧光素酶活力明显下降(P<0.05);突变型表达载体的荧光素酶活力未受影响。说明KRAS (rs11047892)和PDCD4(rs2146544)的位点变异影响基因的表达,可能参与到散发性结直肠癌的发生发展中。
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