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目的:观察光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)对乳腺癌细胞株(MDA-MB-231)的杀伤效果,选择最佳作用参数(光敏剂浓度和光照强度);探讨PDT的作用机制,为PDT在乳腺癌的动物荷瘤模型和临床运用提供理论依据。方法:1、实验分为空白对照组、单纯激光组、单纯光敏剂组和实验组(照光+光敏剂)。对体外培养的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231进行HpD-PDT实验,应用MTT法检测其光密度值OD 492 ,观察不同实验条件下PDT对人乳腺癌细胞在体外的抑制作用,并作光动力效应与光敏剂浓度及光照剂量的相关分析,绘制其抑制曲线和观察其形态学变化;2、应用流式细胞仪技术检测PDT对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞周期阻滞作用;3、应用免疫组织化学技术检测HpD-PDT对PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:1、HpD-PDT组(HpD 2μg/ml,5J/cm2)于治疗后24小时明显抑制体外培养的人乳腺癌细胞,而空白对照组、单纯使用光敏剂组(HpD 2μg/ml)及单纯激光照射组(5J/cm2)对细胞增殖均无明显影响;2、相关分析结果示:在一定范围内,光动力效应与光敏剂浓度和光照剂量均呈直线线性关系;3、HpD-PDT组作用于MDA-MB-231细胞后不同时相的HE染色和电镜图片可见,随着时间延长,凋亡和坏死更加明显;4、流式细胞仪检测结果示:空白对照组G0/G1期比例27.27±3.27%,PDT作用后3h,6h,12h,24h,48h G0/G1期比例分别为36.53±3.72%,35.80±3.05%,39.60±6.90%,47.93±0.51%,42.70±3.15%。PDT作用后早期(12h)G0/G1期比例明显高于对照组(P<0.05),且呈时间依赖性变化,S期和G2/M期变化不明显;5、免疫组织化学结果示:空白对照组、单纯激光组和单纯光敏剂组PCNA阳性表达率