凋亡抑制基因Livin在肝癌中的表达及其与Bcl-2表达相关性研究

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【目的】研究凋亡抑制基因Livin在人原发性肝癌组织中的表达及其与生物学特性的关系;凋亡抑制蛋白Livin与Bcl-2蛋白在肝癌中表达的相关性;凋亡抑制蛋白Livin与肝癌细胞中凋亡增殖的关系。【方法】RT-PCR检测肝癌组织、癌旁正常组织Livin基因表达;Western印迹杂交检测肝癌组织、癌旁正常组织Livin蛋白表达;免疫组织化学法检测Livin及Bcl-2蛋白表达;流式细胞术检测肝癌细胞的增殖活性及凋亡水平。【结果】1、Livin基因在54例肝癌组织中表达阳性率为85.2%(46/54),而在27例癌旁正常肝组织中低表达,阳性率为3.71%(1/27)两者之间差异显著(P<0.05),两种异构体基本同时表达;RT-PCR和Western-blot两种检测方法结果一致。Livin蛋白与Livin基因的表达与原发性肝癌患者的发病年龄、性别、肿瘤的大小、分化程度等均无显著性差异(P>0.05),与肝癌是否发生转移有关,提示其可能成为原发性肝癌特异性诊断及预后不良的一个重要监测指标和肝癌基因治疗的一个新靶点。2、免疫组织化学法结果显示,Livin蛋白在54例肝癌组织中表达阳性率为87.1%(47/54),在27例癌旁正常肝组织中低表达,阳性率为7.41%(2/27)两者之间差异显著(P<0.05)。Bcl-2表达阳性者中,Livin蛋白表达阳性率为95.8%(46/48),Bcl-2蛋白表达阴性者中,Livin蛋白表达阳性率为16.7%(1/6),两者比较,差异有显著性(P<0.01,r=0.252)。3、54例肝癌组织的细胞增殖指数(PI)平均为(29.27±5.72)%。RT-PCR和Western-blot结果中,46例肝癌组织Livin表达阳性,PI为(31.55±16.19)%;8例Livin表达阴性,PI为(27.00±4.26)%,两者比较差异有显著性(t=2.566,P<0.05)。免疫组织化学结果中,47例肝癌组织Livin蛋白表达阳性,PI为(32.22±5.66)%;7例Livin蛋白表达阴性,PI为(26.64±4.43)%,两者比较差异有极显著性(t=3.31 0,p<0.01)。经RT-PCR和Western-blot检测的54例肝癌患者早期凋亡率平均为(2.43±0.91)%。46例阳性表达,8例阴性表达,早期凋亡率分别为(2.55±0.89)%和(3.00±0.26)%,两者比较有显著性差异。【结论】Livin基因在肝癌中高表达,而在癌旁正常肝组织中低表达,与肝癌患者的年龄、性别和组织分化程度无关,而与肝癌发生转移有关。Livin蛋白表达与Bcl-2蛋白表达密切相关。肝癌组织Livin基因表达与肿瘤细胞增殖有关并和肿瘤细胞早期凋亡有关。
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