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该文主要研究了采用Alcalase2.4L(EC3.21.62)水解酪蛋白并以酒精和氯化钙选择沉淀所得酪蛋白非磷肽(Cn-NPP)对ACE(血管紧张素-I转换酶)的抑制作用.通过一种ACE可以水解的发色底物对传统分光光度法进行改进,并采用RP-HPLC法评价肽类对ACE的抑制作用.首先将酪蛋白水解,利用pH-stat法检测获得水解度(DH)分别为10﹪、15﹪和20﹪的三种水解产物Cn-NPP.然后测定了这三种水解产物Cn-NPP对ACE的抑制活力.采用大孔吸附树脂(MAR)来去除由于在控制DH时加入了碱而产生的盐类.对吸附和解吸条件的研究表明温度和流速是吸附过程的主要影响因素,这表明吸附过程的性质属于典型的疏水相互作用.吸附过程表现出有朗谬尔特性的等温吸附性质,(NH<,4>)<,2>SO<,4>对吸附有利显示盐析作用加强了吸附中的疏水相互作用.研究表明采用乙醇从树脂上解吸肽,肽的回收率较高.当所得的肽在Sephadex G-15上进行排阻洗脱时,它表现出典型的非理想排阻洗脱特性,且洗脱受缓冲液的pH和浓度影响很大.测定肽类洗脱组分对ACE抑制活力时发现相对分子质量较低的组分,即出峰时间较晚的组分表现出更强的活性.这表明短肽在抑制ACE方面比长肽表现出更强的活力.这个结果进一步验证了在研究ACE抑制活力与DH这间的关系所得出的结论.此外,当采用阴离子交换树脂吸附肽类时,缓冲液的pH和离子强度对吸附效果的影响显著.最优的吸附条件是pH7.5,缓冲液浓度0.02mol/L.仅仅采用水时肽类也能吸附,而洗脱则采用1.5mol/L NaCl缓冲液.在pH7.5时吸附的肽类表现出良好的ACE抑制活力.凝胶排阻色谱分离所得的第三个色谱峰,即pH7.5时吸附的组分,对ACE的抑制作用比整个的肽类强.这个结果证实了由Alcalase2.4L水解酪蛋白后产生的肽都有抑制ACE的活力.HPLC法测定ACE抑制活力具有较好的分辨率,底物马尿酰-组氨酰-亮氨酸和ACE作用释放的产物马尿酸两峰分离良好.研究发现梯度洗脱分离效果优于非梯度洗脱,同时确认了HPLC法在评价ACE抑制活力时优于分光光度法.研究结果显示了酪蛋白和它所衍生的肽类有不同的ACE抑制活力,而其它的生物活性还有待于测定并对它们进行全面评价.