外源富赖氨酸蛋白质基因cDNA在玉米中表达的研究

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以玉米(Zea mays L.)幼胚诱导的愈伤组织为转化受体,用基因枪轰击的方法将含有编码高赖氨酸蛋白的cDNA(SB401)和hpt基因的质粒p35/35SKH(35/35S启动子)和p19ZKH(19Z启动子)导入玉米,用潮霉素筛选2个月后,将抗性愈伤转移至高糖培养基上诱导分化成苗.共获得再生植株109株(35/35S:48株;19Z:61株),分子检测的结果表明其中44株为转基因植株(35/35S:18株;19Z:26株),可育的转基因植株为20株(35/35S:11株;19Z:9株).转化率在3﹪以上.在职4株赖氨酸含量提高10﹪以上的R<,1>株系中,带有p19ZKH的有9株,赖氨酸含量最高提高了54.8﹪;带有p35/35SKH的有5株,最高的提高了22.6﹪.这一结果表明,在玉米胚乳中,19Z启动子的活性可能要高于35/35S启动子的活性.对SB401 mRNA在R<,0>转基因玉米的纯合后代(R<,1>)的种子中的积累情况进行了Northern杂交分析.在我们的实验条件下,没有发现SB401蛋白在玉米胚乳中的积累对种子的生长发育有任何影响,因此它可以用于提高玉米种子中赖氨酸含量的基因工程,改良玉米营养品质.
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