癌症是一种常见的死亡概率特别高的重大疾病,已成为人类的第一杀手。多年来,抗肿瘤药物的研究与开发一直医药领域的热点,其中寻找毒性低,副作用小、选择性强的新型的抗肿瘤药物,是追求的目标。课题组在前期研究的基础上,近来合成了21种新型的化合物。研究中选取了人结肠癌、胃癌、肝癌、黑色素瘤等16株肿瘤细胞,对课题组合成的这些全新化合物在细胞水平上进行了筛选。作用浓度为25μM,作用时间为48 h,采用MTT法检测,考察化合物对肿瘤细胞生长的抑制活性。其中化合物缬甘二肽阿比特龙酯A-Gly-Val具有较好的活性,能明显地抑制小鼠黑色素瘤B16细胞生长,IC50值为9.73μM,优于临床使用的醋酸阿比特龙(IC50为24.66μM)的活性。在此基础上,对A-Gly-Val和醋酸阿比特龙进行了较深入地研究,分别通过细胞划痕实验,细胞迁移和侵袭实验,流式、免疫荧光、以及Western Blot和PCR实验考察了A-Gly-Val对黑色素瘤B16细胞作用行为。细胞划痕实验结果显示,随着给药浓度的增加迁移率依次降低,浓度达到14μM和16μM时,细胞迁移能力几乎接近零;在细胞迁移侵袭实验中,随着给药浓度的增加,迁移和侵袭的细胞个数逐渐减少。流式结果得出,在大浓度时14μM、16μM时,细胞大部分处于晚凋时期。免疫荧光、以及Western Blot和PCR实验,检测caspase家族和Bcl-2家族蛋白的表达实验,结果显示,发现随着给药浓度的增加促进凋亡蛋白caspase3,caspase8,Bax的灰度值与对照组比较逐渐增大,抑制凋亡蛋白Bcl-2则表达量减少。表明A-Gly-Val抑制肿瘤的生长作用是通过激活caspase9诱发了下游的caspase3,从而启动了凋亡,即通过线粒体途径来实现的凋亡。进一步,在小鼠皮下建立小鼠黑色素瘤B16模型,给药剂量为A-Gly-Val（0.04 mg/g、0.06 mg/g、0.08 mg/g）,和醋酸阿比特龙0.06 mg/g,周期为4周。发现A-Gly-Val有效地抑制了肿瘤的生长,在0.06 mg/g浓度下抑瘤率可达到98.12%,而醋酸阿比特龙抑瘤率可达到76.42%。剥离肿瘤后,将组织通过蛋白印记和免疫组化实验,与模型组比较,A-Gly-Val组促进凋亡蛋白caspase3,caspase8,Bax,表达量较高,抑制凋亡蛋白Bcl-2为低表达量。A-Gly-Val有效的抑制了小鼠黑色素瘤的生长。