集成化的聚苯乙烯电喷雾微流控芯片分析系统的研制

被引量 : 0次 | 上传用户:a69ywc97
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
微流控芯片分析是微全分析(micro total analytical systems,μTAS)的重要组成部分,其特点是集成度高,在微芯片上集成试样前处理、混合、反应、分离等重要功能模块;试样/试剂消耗量低;分析速度快。微流控芯片分析的这些特点正在生化分析应用领域逐步展现其巨大潜力。生物质谱(Bio-Mass Spectrometry, Bio-MS)能够提供试样组分中生物大分子的基本结构及定量信息,是生物化学分析的重要技术。微流控芯片与生物质谱的有效接口是两者联用的关键,也是目前限制微流控与生物质谱联用的重要瓶颈之一。开发一种制作简单、集成度高的一体化的微流控芯片-生物质谱分析系统是当前微全分析系统发展的重点之一与其他高聚物材质相比,聚苯乙烯(polystyrene, PS)具有价廉,生物兼容性好、表面改性技术成熟等优点,使其大量的应用于生物领域,也是高聚物微流控芯片常用的基材之一。据调研,用于质谱分析的PS微流控芯片尚很少有文献报道。本文旨在研制一种基于PS材质的微流控芯片与电喷雾质谱(electrospray ionization mass spectrometry, ESI-MS)的有效接口,通过在PS芯片上集成酶解反应器、微电极、电喷雾探针,实现蛋白质芯片上酶解-在线电喷雾质谱的快速检测。全文共分两部分。第一章,综述了近年来微流控芯片与质谱分析联用技术的研究进展,包括微流控芯片与介质辅助激光解析离子源质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry, MALDI-MS)、电喷雾离子源质谱(ESI-MS)的接口技术、电喷雾方式以及微流控芯片中的集成化模式和功能。第二章,研究建立了集成固定化酶解反应器-金膜微电极-一体化探针的聚苯乙烯电喷雾质谱微流控芯片分析系统。利用化学镀技术在PS片上加工用于电喷雾的金膜微电极;利用微加工技术在芯片通道末端微加工形成一体化电喷雾喷嘴;采用紫外光表面修饰固定化胰蛋白酶,研制了集成化蛋白酶解微流控电喷雾质谱芯片,实现蛋白质的在线酶解和质谱检测。系统考察了样品流速对酶解效率的影响、溶剂流速对喷雾稳定性的影响以及固定化酶反应器的稳定性。实验结果表明,当施加2.8~3.0 kV的喷雾电压,甲醇溶剂流速为400~600 nL/min时,电喷雾较稳定。以细胞色素c为分析对象,0.5 mg/mL细胞色素c(2mmol/L NH4HCO3缓冲液中)以100~400 nL/min的流速流经芯片蛋白酶解反应器(反应时间2.5~10min)时,可以得到很好的酶解效果,MALDI-MS检测结果表明,其氨基酸肽段序列覆盖度为97-70%。在优化条件下,研究建立了蛋白质的在线酶解-nanoESI-MS分析检测系统。该系统性能稳定,酶反应器使用寿命长,样品消耗量少。
其他文献
自上个世纪90年代以来,经济环境日益复杂,企业经营失败风险和财务报表舞弊风险逐渐增加,注册会计师的执业环境发生了重大的变化,审计失败案例层出不穷,涉及注册会计师事务所
<正> 豆腐制作技术起源于我国。我国前汉古书中曾有刘安作豆腐的记载。距今二千一百年前我国劳动人民已经掌握了用大豆制作豆腐的技术。这是我国的一大发明和创造,对人类文明
中华文化源远流长,廉政思想文化、制度文化、政治文化、社会文化是中华文化宝库的重要组成部分,是中国政治、文化的重要遗产。中华传统廉政文化建设的经验,对当前中国特色社
轴承沟道的磨削表面不同程度存在磨削变质层,直接影响轴承的使用性能。根据磨削机理分析,提出了影响磨削变质层深度的主要工艺参数。通过一次回归正交试验设计,对生产现场易于调
规范的信息披露,是保证证券市场公开、公平、公正的前提,随着证券市场对我国市场经济建设的作用日益显著,公众对会计信息质量的要求也越来越高。可是,财务报告舞弊在很大程度
电机产品的优化设计和集成设计一直是设计人员关注的重点。本论文的研究基于浙江大学、浙江省机电设计研究院有限公司为杭州富生电器有限公司进行的“面向电机行业的数字化设
两性关系是人与人之间最基本、最直接的关系,性别的影响和作用存在于社会的各个领域当中。但是,在人类历史上,对于两性关系的认识一直处于众说纷纭、莫衷一是的状态。传统性
西方主流哲学由于片面强调认知理性的主导地位,扭曲了“知情意”的严格界限,不但没法解释“不能自制”的现象,甚至还将它误解成了“意志软弱”。实际上,这类“明知某事更好却
从古至今,土地作为最基本生产资料,一直是人们赖以生存的基础。随着经济社会的迅速发展,土地以其不可再生的资源特性为基础,显化为资产,升华为资本,因此,依法科学高效利用土
抗生素一直是治疗细菌感染的关键药物,然而病原体(特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,MRSA)表现出对许多抗生素类药物有耐药性,本课题组分离鉴定出的多粘类芽孢杆菌J株对病原性细菌和植物病原性真菌有强烈的抑制作用,尤其是对多重耐药性的金黄色葡萄球菌有很明显的杀菌作用。本研究主要分离追踪对MRSA有强烈杀菌作用的抗菌物质。为了获得大量的抗菌物质,通过菌株的选育及单因素试验和正交试验对J株的发酵条件进行优化