超嗜热古菌Thermococcus siculi HJ21产高温α-葡萄糖苷酶的研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:rdhbrth565657ki
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase,EC3.2.1.20)又称麦芽糖酶(maltase)和α-转移葡萄糖苷酶(α-transglucosidase,EC2.4.1.24),可以从低聚糖类底物的非还原性末端切开α-1,4糖苷键,释放出葡萄糖,或将游离出的葡萄糖残基以α-1,6糖苷键转移到另一个底物上,从而得到非发酵性的低聚异麦芽糖(IMO)、糖脂或糖肽等。α-葡萄糖苷酶在淀粉加工工业中可以用作糖化酶制剂,与α-淀粉酶一起生产高葡萄糖浆。另外,α-葡萄糖苷酶作为工业化生产IMO的关键酶制剂备受国内外食品工业界的重视。目前,工业生产中使用的α-葡萄糖苷酶主要来源于黑曲霉(Aspergillusniger)。 对一株分离自深海热液口的超嗜热古菌(ThermococcussiculiHJ21)菌株进行了产α-葡萄糖苷酶条件的优化和酶学性质的初步研究。胞内发酵时间为6h,胞外发酵时间为21h时,较适合产α-葡萄糖苷酶;其最适产酶温度为85℃,pH为6.5,NaCl浓度为2.5%;可溶性淀粉、酵母粉和蛋白胨促进产酶。该α-葡萄糖苷酶的最适作用温度为100℃,90℃半衰期为2h;最适酶作用pH值为7.0,在pH为5.0~8.0之间酶活力相对稳定;该酶热稳定性不依赖Ca2+,且Ca2+对该酶有抑制作用,金属离子Cu2+、Al3+、Ni2+对该酶有较明显抑制作用,Hg2+强烈抑制该酶的活性,而EDTA、Fe3+和K+对该酶有激活作用。 以T.siculiHJ21染色体DNA为模板,采用PCR技术,成功克隆了T.siculiHJ21的α-葡萄糖苷酶基因。基因序列结果显示,该基因开放阅读框大小为729bp,编码的蛋白质分子含有242个氨基酸残基,分子量约27.2kDa。同Genbank数据库中已公开的α-葡萄糖苷酶基因序列进行同源性比对分析结果表明,T.siculiHJ21的α-葡萄糖苷酶的基因序列与Thermococcushydrothermalis的α-葡萄糖苷酶亲缘关系最近,同源性达到81%,氨基酸同源性达90%。
其他文献
学位
已有关于锚板承载力系数的研究成果大多没有考虑土体的应变软化,而实际工程中的锚板基础不仅受到静荷载的作用,还会受到风浪流等循环荷载的作用。在循环荷载作用下,土体塑性
地下埋管广泛地应用于水利、交通、市政建设及能源部门,主要分为沟埋式和上埋式。有文献表明,由于缺乏合理的垂直土压力计算理论,埋管在运营中常出现各种病害。尤其是沟埋式管道
摘要:随着农村教育改革之后,各地的农村寄宿制学校如雨后春笋般应运而生,寄宿制学校的确能够更好的整合教育资源,但是却致使大量的学生离开家庭,进入到学校这个集体中生活,这就需要学校和老师要尽快的培养学生的自理能力,帮助学生尽早的适应寄宿制学校的学习生活模式。笔者从事多年的寄宿制学校工作,通过经验与案例来浅述农村寄宿制学校学生自理能力的养成。  关键词:农村;寄宿制学校;自理能力  对于绝大多数的学生来
  民族教育发展与民族地区的民生改善具有内在依存关系。作为社会事业的教育发展,其本身就是民生改善的重要内容;通过教育提升民族成员在民生改善过程中的主体性,则是教育民生
随着我国基础设施建设的持续推进,水工隧洞等大型地下结构的建设和发展也日益加快,尤其是高压水工隧洞,在国内已有了大量的工程应用。自人类开挖隧洞以来,基于衬砌结构的设计
植物体是一个开放的体系生存于自然环境。天南地北,水热条件相差悬殊,即使同一个地区,一年四季也有冷热旱涝之分。有些农作物不能适应这些不良环境,严重时会导致绝产。因此提高
  山区少数民族教育中存在的低学业成绩和"读书无用论"等问题显示,学校教育在物质条件方面的改善(免费义务教育、改善学校设施条件、少数民族家庭教育负担减轻等)与少数民族
  复杂性是对复杂系统的复杂性质描述的统称。复杂系统具有自组织性、非线性、不确定性和涌现性等复杂性质。民族地区新课改一方面沿袭着国家范围内新课改的复杂性,同时又产
会议
民族地区的教育呈现出城乡发展失衡、结构发展失衡和主体发展失衡等特点,教育经费短缺、优质教育资源不足、民族教育的复杂性等问题是制约民族地区教育均衡发展的主要障碍.云