谷胱甘肽-S-转移酶P1基因多态性及其与奶牛热应激关联性研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangguoliang
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谷胱甘肽-S-转移酶Pi(GSTP1)是动物体内重要的解毒酶,清除细胞受热应激产生的自由基,对维持细胞正常的生理功能发挥重要作用。本研究以谷胱甘肽-S-转移酶基因为候选基因,采用测序技术研究了谷胱甘肽-S-转移酶基因的SNPs及其与及奶牛热应激之间的关系,结果如下:GSTP1基因全序列为2869bp,对30头中国荷斯坦奶牛和15头鲁西黄牛样本的PCR产物测序后检测到35个SNPs,其中19个SNPs为新发现。除鲁西黄牛GSTP1基因第2696位点外,其它SNP位点没有引起氨基酸的改变,鲁西黄牛GSTP1基因第2696位点G→A,导致缬氨酸突变为蛋氨酸。对120头荷斯坦奶牛样本的G17C、T326C和A2696G 3个SNPs进行PCR-RFLP分析,结果显示:在G17C位点检测到G和C2个等位基因,其频率为0.4791和0.5209,GG、CG和CC3种基因型频率分别为0.2583、0.4417和0.3000;在T326C位点检测到M和N2个等位基因,其频率为0.8917和0.1083,MM、MN和NN3种基因型的频率分别为0.8167、0.1500和0.0333;在A2696G中没有检测到多态性。对70头鲁西黄牛样本的A2696G位点进行PCR-RFLP分析,发现E和F两种等位基因,其频率为0.1286和0.8714。采用SAS软件一般线性模型分析G17C和T326C位点不同基因型与荷斯坦奶牛的直肠温度、红细胞中钾离子浓度等耐热指标的相关性,发现所有基因型与耐热性指标相关性均不显著(p>0.05)。应用RT-PCR技术检测了GSTP1基因在正常和严重热损伤奶牛的组织表达差异,结果表明:GSTP1基因在正常和严重热损伤牛的心、肺、肾、脾中均有表达,但差异不显著(p>0.05),在正常牛的肝中几乎无表达,而在严重热损伤的奶牛的肝中则高表达,差异显著(p<0.05)。
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