【摘 要】
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miRNAs是一类大小约22个核苷酸(nts)的内源性非编码小RNAs,通过与mRNA3UTR完全或不完全互补结合降解靶mRNAs或抑制其翻译,参与细胞增殖、分化、代谢和凋亡等过程。前期研究发
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miRNAs是一类大小约22个核苷酸(nts)的内源性非编码小RNAs,通过与mRNA3UTR完全或不完全互补结合降解靶mRNAs或抑制其翻译,参与细胞增殖、分化、代谢和凋亡等过程。前期研究发现miR-29c在胃癌中的表达量明显下降,并预测抗凋亡基因Mcl-1为miR-29的靶基因之一,其在胃癌组织中高表达并与miR-29e的表达呈反比相关。
本研究构建相关载体并应用荧光素酶报告基因技术进一步证实miR-29b/c与Mcl-1靶向作用关系。用Western blot检测10例胃癌组织中Mcl-1蛋白表达情况。通过细胞转染,在胃癌细胞BGC-823中高表达miR-29b/c,用实时定量PCR及Westernblot分别检测Mcl-1 mRNA和Mcl-1蛋白的表达变化,并采用WTT试验,DAPI染色,流式细胞术检测其对细胞增殖、凋亡、细胞周期和药物敏感性的影响。
结果发现,胃癌组织中Mcl-1蛋白表达下降,miR-29b/c可以通过直接作用于Mcl-13UTR,进而影响Mcl-1 mRNA和蛋白在胃癌组织中的表达水平。过表达miR-29b/c可抑制细胞的增殖,促进BGC-823胃癌细胞凋亡,使细胞周期受阻于S期,同时可以增加胃癌细胞对化疗药物DOC的敏感性,使化疗药物更有效的发挥抑制和杀伤作用。
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