正品丹参及山东丹参不同地理居群的DNA分子标记的开发及鉴定

来源 :烟台大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jjuuhhuu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
丹参是唇形科鼠尾草属植物Salvia miltiorrhizaBge.的干燥根及根茎,在中药体系中占有重要地位。随着丹参需求量的大幅度增加以及野生资源的逐渐减少,栽培品已成为丹参药材的主要来源。甘西鼠尾草、滇丹参、拟丹参和毛地黄鼠尾草等由于和丹参外观的相似性,经常被误认为丹参。尽管分子标记在鼠尾草属的鉴别中早已有所应用,但是丹参与其混淆品间仍需建立一种快速有效的鉴定方法。另外,虽有研究表明山东产丹参均为优质丹参,但省内不同产区、不同丹参种质间的药用成分含量差别很大。由于丹参的变种或变型在药材性状上的差别不大,缺乏有效的鉴定方法,因此各产区向来混同收购,严重影响了山东丹参药材产量和质量的稳定性,并成为丹参规范化栽培及优良品种选育和推广的瓶颈。  本研究以正品丹参、4种丹参混淆品、及山东丹参的4个居群及烟台航天丹参品种为材料,利用核DNA的内转录间隔区及Major latex-like protein(MLP)基因序列为目标,分别挖掘了正品丹参、山东莱芜丹参居群和烟台航天丹参的特异SNP分子标记,并利用等位基因特异PCR进行了鉴定,实验结果如下:  1.核DNA的内转录间隔区序列对丹参、甘西鼠尾草、滇丹参、拟丹参和毛地黄鼠尾草这五种鼠尾草属物种分析,发现了其核内转录间隔区具有丰富的DNA多态性和大量的单核苷酸位点。利用等位基因特异性引物(SMR、SSR和SYR)建立的多重PCR体系能够在一个反应中同时鉴定4种鼠尾草属物种。  2.利用MLP内含子基因序列对山东省内不同地理居群丹参分析,发现不同居群中存在大量的单核苷酸多态性位点及缺失插入序列。其中莱芜产丹参在562 bp上存在SNP特异性位点。针对此位点,设计了位点特异性引物LWF,并利用多重特异性PCR成功鉴定出莱芜产丹参。  3.烟台航天丹参在MLP内含子区域存在一段特异性的插入,依此设计航天搭载丹参的特异性引物ASF、ASR,利用这对引物可成功将烟台航天丹参从山东省内其他居群丹参分辨出来。  因此,丹参与其丹参掺杂品这种鉴定的方法不仅简单可靠,而且作为一种重要工具弥补了在控制丹参质量上形态学鉴定和化学鉴定的不足。另外,在本研究中发现在MLP内含子基因区域在丹参种内存在大量的多态性,并可用于筛选和鉴定航天搭载丹参品种和莱芜丹参地理居群,该方法可为其他中药不同居群的区分和鉴定提供借鉴。
其他文献
铜藻(Sargassum horneri)是一类可食用褐藻,不仅富含矿物质及多种人体必需氨基酸,还含有多糖、蛋白质等多种生物活性成分。目前国内外研究大多集中于其大分子活性物质,而对于低极性的植物甾醇等小分子化合物的研究则相对较少。研究表明植物甾醇能抑制人体对胆固醇的吸收,有效地降低人体中低密度脂蛋白的浓度,并具有抗肿瘤、抗炎、抗糖尿病等作用。然而因为含量较低、结构相似等特点,传统的分离分析方法效率
目的探讨视锥蛋白样蛋白-1(VILIP-1)评价颅脑损伤程度及高压氧(HBO)治疗疗效的价值。方法将296只Wistar大鼠按照数字表法随机分成假创伤组(n=70)、轻中度创伤组(n=70),中重度创伤组(n=91)和中重度创伤后HBO干预组(HBO组,n=65)。HBO组大鼠在创伤后24 h即行HBO治疗,各组于创伤后6 h按照Zea-Longa等级评分法评估颅脑损伤程度。假创伤组、轻中度创伤组
本文通过对荣华二采区10
期刊
单核细胞增生性李斯特菌(Listeriamonocytogenes,简称LM,单增李斯特菌)是一种重要的食源性致病菌,该菌广泛地存在于环境中,传染途径繁多。近年来大规模的李斯特菌病频频爆发,引起
目的探讨某含咖啡因维生素功能饮料对小鼠中枢神经系统氧中毒(central nervous system oxygen toxicity, CNS-OT)的作用。方法40只SPF小鼠按数字表法分为空白组、对照组、赋形剂组和饮料组,每组10只。空白组、对照组不作任何处理,赋形剂组给予生理盐水0.4 ml灌胃,饮料组给予功能饮料灌胃,30 min后CNS-OT造模。结果给予小鼠该功能饮料灌胃后,与赋形剂
目的研究沙虫酶解多糖合并丹参、黄芪、淫羊藿提取物(参芪藿颗粒)对模拟高强度训练小鼠的抗疲劳作用及其药理机制。方法80只昆明种小鼠按数字表法随机分为4组,分别为对照组、沙虫多糖组、参芪藿中药制剂组(简称中药制剂组)、沙虫联合中药复方制剂组(简称联合制剂组),每组20只。灌胃给药28 d后分别观察小鼠力竭游泳时间及血乳酸、尿素氮、肝糖原等生化指标的变化。结果各给药组小鼠体质量和对照组相比差异无统计学意
本文通过对荣华二采区10
期刊
热声发动机可将热能转化为机械能,用于驱动制冷(热泵)或者发电系统等。一些高性能的单相热声发动机效率可以与内燃机、斯特林热机等传统热机相媲美,但单相热声发动机的起振温度、
目的探究高压氧(HBO)对脆性X综合征(FXS)模型小鼠异常行为的影响,为下一步HBO治疗FXS提供理论依据和实验支持。方法将20只Fmr1基因敲除小鼠采用数字表法随机分为HBO治疗组和对照模型组,每组10只。对HBO治疗组小鼠进行共20次HBO干预;对照模型组小鼠不作任何处理,正常饲养。21 d后对2组小鼠进行高架十字迷宫实验、旷场实验和三箱社交实验。结果HBO治疗组小鼠与对照模型组小鼠相比,在
目的评估多种营养素强化复合粉在肝脏外科中的应用价值和安全性。方法前瞻性收集海军军医大学附属东方肝胆外科医院2017年1月至2018年3月收治的180例接受计划性肝脏部分切除术的患者,依据知情同意的原则分为治疗组和对照组。治疗组91例患者接受口服多种营养素强化复合粉的补充疗法,直至术前4 h改禁食、禁水饮食。对照组89例患者,术前12 h开始禁食、禁水,接受术前外周静脉补液。观察2组患者不良反应发生