应用cDNa-AFLP技术分析铜胁迫下水稻根系基因差异表达

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wusic
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
随着现代工业的发展,重金属污染已经成为日益严重的社会问题。许多重金属是植物生理过程必需的微量元素,如锌、铜是许多酶的组成成分,但这些必需金属和非必需金属一旦超过最适浓度,就会对植物产生很强的毒害作用。植物在适应环境的过程中逐渐形成了一系列对重金属的耐性机制,如螯合、区室化和排斥等。水稻(OryzasativeL.)是世界上许多国家的粮食作物,也是单子叶模式植物。本论文以本实验室筛选和鉴定的耐铜水稻品种B1139和敏铜水稻品种B1195为试验材料,采用水培方式,运用利用cDNA-AFLP(cDNA扩增长度片段多态性)方法,研究了铜胁迫对水稻幼苗根系基因表达的差异,为进一步阐明植物的重金属耐性机制提供理论基础。  cDNA-AFLP是一种常用的基因差异表达分析技术。本实验利用限制性内切酶AseI和TaqI对水稻根系cDNA进行双酶切后,连接多核苷酸接头,利用有两个选择性碱基的引物进行PCR扩增。结果显示,在所用电泳条件及PCR反应体系相同的情况下,不同的引物组合有不同的电泳图谱,同一引物组合可以得到相同的条带。而且在克隆得到的DNA片段序列中含有特定的接头和选择性碱基序列(选择性引物序列),表明cDNA-AFLP方法具有较高的可靠性和重复性。  本研究选用8个A-NN和4个T-N引物,共32对引物组合进行选择性扩增,每个引物组合扩增的条带数可达20条以上,条带清晰,共扩增得到大约700条条带,获得的22个差异性片段,测序后在GenBank核酸数据库中利用BLAST进行同源搜索,可大致将其分:转录因子、胁迫响应、抗氧化、光合作用、细胞壁合成、细胞信号转导相关及其他等7类。其中编码锌指蛋白、PR10、MT、Trxs、GTS、CAM2等蛋白的基因可能是水稻耐铜机理中的关键基因,为下一步深入研究水稻根系耐铜机理奠定了良好的基础。
其他文献
  Concentrations of eight heavy metals(As,Cd,Cr,Cu,Hg,Ni,Pb,and Zn)were measured on 92 topsoil samples collected from agricultural areas in the city of Daye i
马铃薯晚疫病是一种由致病疫霉真菌引起的世界性流行病害,可以导致马铃薯茎、叶和块茎等组织的坏死腐烂,严重影响其品质及产量。目前,防治该病害最具有前景的方法是筛选高效稳定
  Objective: To compare the preparing time,preparing effect and instruments wear between Reciproc and Mtwo NiTi system in molar curved root canals.Methods: Si
会议
  OBJECTIVES: Resection of tumors arising from Parapharyngeal space and the tongue base is difficult to manipulate because of their deep and obscure location,
会议
  Objective:(1)To investigate the emotional disorder situation in the patients with Burning Mouth Syndrome(BMS).(2)To detect the brain struture and regional c
会议
  PURPOSE: The purpose of this study was to make clinical and magnetic resonance imaging(MRI)evaluation for the temporomandibular joint(TMJ)internal derangeme
会议
  PURPOSE: ①To investigate the main risk factors of juvenile recurrent parotitis(JRP)and to presume pathogenesis of JRP;②To evaluate the change of serum amy
会议
本文以动物皮胶原纤维为底物,通过胶原-单宁-醛反应制备出了固化单宁吸附材料,并系统的研究了该吸附材料对Mo(Ⅵ)和V(Ⅴ)两种金属的吸附特性。研究了酸度(pH)、温度、初始金属
  Introduction: It is quite common that there are gingival recession near the cleft in patients with cleft lip and palate,especially on maxillary central inci
会议
萜类是是指具有(C5H8)n通式的烃类及其含氧衍生物,可以看成是由异戊二烯或者异戊烷以各种不同方式连结而成的一类天然化合物。迄今为止,人们已经从自然界中各种生物里分离鉴定