中药复方是中医临床最主要的用药形式,也是中医辨证论治理论的具体体现。中药尤其是中药复方的药效物质研究在中医药现代化进程中具有重要意义。本研究以抗血管新生小复方——清络方(QLF)为研究对象,借助高效液相色谱(HPLC)和液相色谱-质谱(LC-MSn)联用技术,开展了清络方的体内、体外成分分析的研究工作。第一部分用高效液相-紫外检测色谱仪建立了对清络方水煎液中五个主要活性生物碱(氧化苦参碱、苦参碱、氧化槐果碱、青藤碱、小檗碱)成分同时进行定量分析的方法。通过认真筛选色谱柱、仔细调节流动相组成和pH值并不断改变梯度洗脱程序,最终优化色谱条件,实现在较短的时间内(28min)同时对清络方五个生物碱成分进行含量测定。文中特别对p H值对各生物碱色谱行为的影响作了认真探讨,可供色谱理论研究工作参考。通过应用该法对清络方单味药水煎液中相应生物碱含量进行分析测定,推导了复方中其他中药对各生物碱含量的影响。第二部分主要采用液-质联用色谱仪对清络方各单味药水煎液、清络方复方水煎液、大鼠空白血浆及大鼠给药清络方后的含药血浆进行系统全面的分析比较,得到清络方被吸收或被转化吸收入血中的分子信息。论文工作首先将复方与各单味药的色谱-质谱信息对比,找到各成分的单味药归属,再与单味药的文献报道数据对照,得到复方中各成分信息;然后将空白血浆与大鼠灌胃清络方后三个时间点(20min、1h、2h)取血的含药血浆对照,得到血浆中新增的成分信息;最后将两次结果进行对比(体内外对比),得到清络方在大鼠体内被吸收或被转化吸收入血中的成分m/z信息:205(N-甲基金雀花碱)、265(槐花醇或苦参中分子量为264的某化合物)、249(1)(槐定碱或异苦参碱或白金雀花碱)、330(青藤碱)、249(2)(苦参碱)和247(槐果碱);给药20min后出现清络方原药中不存在的质荷比为293和316的两峰,并且1h和2h血浆均出现这两个峰,推测可能为小檗碱在生物体内的转化物,或清络方中其他某些成分的转化物,也不排除可能是清络方作用于大鼠后血浆中产生的内源性物质。其中由小檗碱2到3级质谱碎裂峰中出现m/z292峰,推测m/z293峰较可能为小檗碱在生物体内的转化物。此外,随给药后时间增加,血浆中又陆续出现了m/z494、760、672分子量较大的质谱峰,推测为药物代谢产物。