IRE1α在非洲爪蛙心脏发育中的作用

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内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)是指由于某种原因导致细胞内质网内稳态失衡、生理功能发生紊乱的一种病理过程,未折叠蛋白反应(Unfol ded protein response,UPR)可缓解内质网应激。肌醇依赖性激酶1α(Inositol requiring enz ym e 1α,IRE1α)是内质网中的一种Ⅰ型跨膜蛋白激酶/RNase,通过其RNase酶活性剪接激活下游分子XBP 1,进而介导UPR。IRE1α参与多种病理过程,并在胚胎发育过程中发挥重要作用,实验室前期研究发现敲降IRE1α后胚胎心脏搏动明显减弱,提示IR E1α可能在心脏发育中发挥作用。本文以非洲爪蛙为模式动物,利用其胚胎量多、体积大以及易操作等优点,研究IRE1α在心脏发育中的作用。向胚胎中注射反义寡核苷酸MO特异性敲降IRE1α的表达,在特定时期收集胚胎,采用实时定量PCR、Western bl otting、原位杂交、组织切片、透射电镜、免疫组化、基因芯片技术对胚胎进行检测分析,发现敲降IRE1α的胚胎心脏变小,心脏组织结构和细胞超微结构受到破坏,心脏的标志基因Nkx2-5、TnIc、Gata4、Gat a6、Tbx20表达下调,但对体节发育并无影响。敲降IR E1α下游基因XBP1s的胚胎也表现为心脏变小、心脏发育标志基因表达下调。此外,基因芯片结果显示,敲降IR E1α或XBP1s的胚胎中Wnt信号通路基因表达上调。以上结果提示IRE1α参与心脏发育,并可能通过XBP1途径调节Wnt信号发挥作用。
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