褐藻多酚的抗氧化活性研究

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Phlorotannins是发现于褐藻且仅存于褐藻中的一族天然产物,以间苯三酚为结构单元,被译为褐藻多酚或褐藻单宁。它结构独特、具有强烈的抗氧化活性,在褐藻中扮演着重要的角色,保护藻体免受紫外辐射的伤害、抵御其他食草动物的牧食、防止氧化暴发造成机体伤害等等,其潜在的生物活性已被广泛应用于食品、药品及化妆品等工业中。因此,褐藻多酚的组成及抗氧化活性研究具有重要的理论意义和应用价值。本论文以几种经济褐藻为原料,包括铜藻、羊栖菜(采自浙江省),泡叶藻、F藻、N藻、面条藻、树皮藻(智利巨藻、山东洁晶集团提供)。研究内容主要包括以下4个部分:1.褐藻多酚含量测定方法的建立:分别选用没食子酸和间苯三酚作为标准物质,采用单因素实验对Folin-Ciocalteu法测定多酚含量中各工艺参数进行优化,结果表明:采用30%福林酚试剂、12%Na2CO3、反应温度30℃、反应时间60min、避光反应、750nm测定吸光度,作出的标准工作曲线线性相关性高(浓度范围1.25-500ug/mL,R2分别为0.9983、0.9988)、重现性好、动力学上可行,两者都可以作为标准物质对多酚含量进行定量分析。2.对几种经济褐藻来源的多酚含量及抗氧化活性进行分析:结果显示,浙江省的大宗经济褐藻—铜藻和羊栖菜的多酚含量最高、抗氧化活性最强,是提取褐藻多酚的良好资源。另外在同样的提取条件下,鲜藻多酚含量要高于干藻的含量。3.不同部位多酚含量的比较分析:以羊栖菜为例,分别研究了两个部分(茎和气囊)的多酚含量,结果显示气囊多酚含量高于茎提取多酚的含量。4.褐藻多酚提取工艺的初步优化研究:以羊栖菜为例,采用有机试剂浸提为前处理手段,通过反相柱,以多酚的提取率为指标,分析不同极性部位多酚含量,得到较高纯度的褐藻多酚部位并比较分析了其DPPH自由基清除能力。其中40%甲醇部位的多酚含量最高、可高达50%以上,DPPH自由基清除能力较强、当浓度为1mg/mL时清除率达90%以上。以铜藻为例,采用超声波细胞破碎技术对褐藻多酚进行提取,以多酚提取率和DPPH清除率为指标,采用单因素实验法对不同酒精浓度溶媒提取效率进行分析,结果表明细胞超声破碎法的提取效率显著提高且提取时间短,70%酒精的提取率最高(3698.617ugGAE/g样品干重)、DPPH清除能力最强(IC50=1.28mg/mL);此外在铜藻来源多酚的纯化过程中,意外地得到了纯度高达80%以上的岩藻黄素(HPLC分析),且操作简单、快速、无需采用任何色谱手段,为铜藻的综合开发利用,提取褐藻多酚、岩藻黄素以及其他产物奠定了基础。
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