小柴胡汤是仲景和解少阳的著名古方，临床常用于治疗肝胆、消化、神经、呼吸等系统的多种疾病，现代研究也表明本方具有解热、抗炎、抗肝损伤等多种药理作用。柴胡-黄芩作为小柴胡汤中的核心功能药对，具有“清透半表之邪和清泻半里之热”的功用，体现着小柴胡汤和解少阳作用的主要方面。目前的研究已证实，单味柴胡、黄芩及其成分均具有解热、抗炎、保肝等活性，提示柴胡与黄芩配伍是小柴胡汤现代主要药理作用的关键部分。本实验将柴胡－黄芩药对作为复方研究的切入点，对其合煎液与分煎液的药理作用进行比较；并对具有较优效用的煎液中的主要化学成分群进行了系统分离，分离出五个成分群；并从复方化学配伍的角度，研究了不同成分群配伍与退热和保肝药理作用之间的相关性，以探察柴胡－黄芩药对退热、保肝效用的物质基础。1 柴胡－黄芩合煎液与分煎液药理作用比较实验目的：比较柴－芩合煎液与分煎液在退热、保肝方面的作用差异。实验（1）以20μg/kg剂量LPS腹腔注射诱导大鼠发热模型，给药组在造模同时分别灌胃给予柴－芩合煎液与分煎液(剂量为10g/kg)；实验（2）以80μg/kg剂量腹腔注射LPS诱导大鼠发热模型，120min后给药组分别灌胃给予合煎液与分煎液（剂量为10g/kg）。腹腔注射LPS后，每30min测定肛温一次，连续监测330-450min，计算体温变化值(ΔT)。保肝模型则采用腹腔注射CCl4复制大鼠肝损伤模型。造模前，给药组大鼠分别灌胃给予合煎液与分煎液（剂量为10g/kg），每日一次，连续5天。末次给药后2hr，腹腔注射50%的CCl4／植物油溶液（剂量为2ml/kg）；24hr后眼眶穿刺取血，测定血清中ALT、AST、ALP酶活力和TBIL含量。结果显示，LPS能引起大鼠体温明显升高。20μg/kg剂量LPS诱导的大鼠发热呈二相峰；80μg/kg剂量LPS引起的发热呈三相峰，且均以最末峰的峰值最高。柴－芩合煎液与分煎液对两剂量LPS诱导的大鼠发热均有明显的抑制作用<WP=5>（P<0.05和P<0.01），两者之间虽在退热效度上无显著差异，但综合分析其对两个模型的作用发现，合煎液解热起效时间较早，具有较优的退热作用。腹腔注射CCl4 造成大鼠明显的肝损伤，表现为血清中ALT、AST、ALP酶活力和TBIL含量均明显升高（P<0.05或0.001）。柴－芩合煎液与分煎液均能显著抑制模型大鼠血清ALT、AST升高（P<0.001），表明两煎液均有确切的保肝作用；其中合煎液对血清ALP酶活力及TBIL含量的升高还表现出显著抑制作用（P<0.05），而分煎液对ALP的作用不明显（P>0.05）。提示两煎液在保肝作用的环节以及效度方面有所不同，柴－芩合煎液的保肝效用优于分煎液。上述研究为选择柴－芩合煎液作为化学成分群分离对象提供了一定的依据。2 柴－芩合煎液中主要化学成分群的分离实验目的：以柴－芩合煎液为切入点，对其主要化学成分群进行大体的分离，在对复方水煎液中化学成分群系统分离进行方法学尝试的同时，也为进一步的药对化学成分群配伍与药效相关性研究提供供试药品。收集中药水提取过程中蒸馏出的芳香水，并将煎液进行重蒸馏，收集重蒸馏液，合并两者，并以石油醚(30-60)反复萃取，得化学成分群B；水煎液浓缩至浓度为100%（每100ml中含原药材100g），分别以60%和80%浓度醇沉，收集沉淀，得成分群A；去除沉淀后的醇溶液，回收尽乙醇后，上聚酰胺柱(上样量为1:2.1)，依次以水、50%和95%乙醇梯度洗脱，分别收集水洗脱液和醇洗脱液；水液适当浓缩后，以水饱和正丁醇萃取，正丁醇溶液回收溶剂至干，得成分群C；乙醇溶液回收溶剂，得成分群D；正丁醇萃后水溶液浓缩，收集，作为剩余混合物E。分离后以茴香醛-浓硫酸、molish、Liebermann-Burchard及HCl-Mg粉反应检识各化学成群中含有的主要成分。检识结果显示：化学成分群A主要含多糖类成分，同时混有少量皂苷类成分；B主要含有挥发油类成分；C主要含有皂苷类成分，同时有少量多糖和黄酮类成分混杂；D中主含黄酮类成分，少量皂苷为其中的杂质成分；混合物E中除杂有少量多糖外，基本不含有A、B、C、D几类成分。3 柴－芩药对中的化学成分群配伍与退热、保肝作用的关系<WP=6>实验目的：探讨柴－芩水煎液中分离出的各化学成分群之间不同配伍与退热、保肝药理作用的相关性，旨在从化学成分群层次上揭示柴－芩药对退热、保肝的药效物质基础。依照正交设计L8(27)表将柴－芩合煎液中分离出的5个化学成分群，依次配制成化学成分群配方1-8，分别进行退热、保肝实验。以80μg/kg剂量腹腔注射LPS诱导大鼠发热模型；造模同时，中药各组分别灌胃给予化学成分群配方1-8（剂量均为折合原药材10g/kg）；从腹腔注射LPS开始，每30 min测体温1次，连续观察330min,计算各组体温变化值ΔT。以CCl4腹腔注射诱导小鼠急性肝损伤模型。造模前，中药各组分别灌胃给予化学成分群配方1-8（剂量均为折合原药材10g/kg），每日一次，连续5天。末次给药后1hr，以10ml/kg剂量腹腔注射2% 的CCl4／植物油溶液造成小鼠急性肝损伤；17hr后摘眼球取血，测定血清中ALT活性。结果显示，在大鼠发热最高峰值处（330min），配方1、4、5、6、7组能够显著降低LPS引起的大鼠体温升高(P<0.05)，显?