苏丹红Ⅰ（SudanI）即1-苯基偶氮-2-萘酚，是一种人工合成的脂溶性化工染料，并被证明是一种潜在的致癌物质，禁止作为食品染料添加在食品中。2003年5月，法国从印度进口的红辣椒粉中检出苏丹红Ⅰ，对此发出紧急通知。在中国，2005年2月至5月苏丹红Ⅰ不断在各种食品中检出，比如：鸡腿、汉堡、辣泡菜和辣椒酱等，引起人们消费恐慌。随着科学技术的发展和国家的重视，其检测方法也不断发展。目前已有电化学分析法、光谱法、色谱法、液相色谱-质谱联用技术、免疫分析技术等检测方法。酶联免疫吸附分析法（ELISA）是一种简单、准确、快速的分析方法，具备灵敏度高、特异性强等特点，己广泛应用于临床医学检验、生物分析、食品分析和环境分析等领域中。为了建立快速、灵敏的苏丹红Ⅰ残留免疫学分析方法，本研究在分析苏丹红Ⅰ免疫学特性的基础上，采用单克隆抗体技术制备了苏丹红Ⅰ单克隆抗体，并组装了间接竞争ELISA试剂盒。　　本研究主要内容包括：⑴重氮化法合成苏丹红Ⅰ的结构类似物（CSDI），以活性酯法将 CSDI与载体蛋白偶联，制备BSA-CSDI免疫抗原与OVA-CSDI。并用紫外扫描（UV）和聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）进行鉴定。用 SudanI人工免疫抗原（BSA-SudanI）免疫BALB/c小鼠。间接ELISA测定多抗血清效价，阻断ELISA鉴定其抑制价。动物免疫试验结果显示：3只小鼠血清效价均达到了1×1.28-4，且3号小鼠多抗血清抗SudanI的IC50为67ng/mL，表明成功获得了高效价、特异性好、亲和力较高的鼠源抗 SudanI多抗血清，为 SudanI残留免疫学检测方法的建立奠定了基础。⑵间接ELISA和间接竞争ELISA检测法选择细胞融合备用鼠；运用杂交瘤技术制备苏丹红Ⅰ单克隆抗体（SudanImAb），并对单克隆抗体的效价、亲和力、敏感性、特异性和亚型进行鉴定；体内诱生腹水法大量制备单克隆抗体。筛选出了6H6B1、6H6E6、6H6G10、6F12E2、6F12E5和6F12G2六株敏感特异的杂交瘤细胞；鉴定单抗亚型均为IgG1；细胞培养上清间接 ELISA效价在1:6.4×102～1:1.28×103之间，6H6E6细胞株制作的腹水效价为1:6.6×105，苏丹红ImAb亲和常数(Ka)为1.85×1010L/moL和1.94×1010L/moL，对苏丹红Ⅰ的 IC50为2ng/mL；与其它标准品无交叉反应。通过试验获得了高效价、敏感、特异的苏丹红ImAb，可用于动物性食品中苏丹红Ⅰ的残留检测的免疫学试验。⑶根据酶联免疫吸附试验原理，应用苏丹红ImAb研制出苏丹红Ⅰ残留快速检测间接竞争ELISA试剂盒（SudanI-Kit），SudanI-Kit的标准曲线呈S型，符合4参数logit曲线拟合，最低检测限为0.2ng/mL，半数抑制浓度IC50为2ng/mL，平均批内和批间变异系数小于<15％。对两个样品生番茄样品和辣椒面样品分别添加1、20、60、100ng/mL苏丹红Ⅰ标准品，平均回收率分别为90.005%和88.475%。SudanI-Kit性能稳定，在4℃可保存6个月。