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研究目的:本课题研究目的旨在通过建立体内、体外胰岛素抵抗模型,观察β3-AR激动剂倍他福林对胰岛素抵抗的影响,从而为开发抗糖尿病药物提供实验依据。研究方法:(1)体外实验研究中,在培养的HepG2细胞中加入5×10-7M的胰岛素,孵育16h,通过测定细胞培养液中的葡萄糖的消耗量来评价HepG2细胞的胰岛素抵抗状态。然后加入倍他福林(1×10 -6～10 -4M)与之共孵育24h,,观察葡萄糖消耗量的变化,并以western blotting法检测倍他福林对胰岛素抵抗HepG2细胞GLUT-4蛋白表达的影响。(2)体内实验研究中,以地塞米松(1mg/kg,隔日肌注)3周建立大鼠胰岛素抵抗模型,然后给予倍他福林(剂量分别为7 mg/kg/d ,20 mg/kg/d和60mg/kg/d )治疗3周,以试剂盒检测血葡萄糖、甘油三酯,胰岛素以及肝脏肝糖原的含量变化,并以western blotting法检测肝脏GLUT-4蛋白表达,HE染色观察胰岛的病理改变。实验结果:(1)体外实验研究中,在培养的HepG2细胞中加入5×10-7M的胰岛素,孵育16h,葡萄糖的消耗量与对照组相比显著减少(P<0.01)。与模型组相比,倍他福林可呈浓度依赖性的增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量(P<0.05),倍他福林也可呈增加胰岛素抵抗HepG2细胞的GLUT-4的表达(P<0.01)。(2)体内实验中,大鼠给予地塞米松(1mg/kg,隔日肌注)3周,大鼠血糖与对照组相比显著增加(P<0.01)。与模型组相比,倍他福林可呈浓度依赖性的降低胰岛素抵抗大鼠血糖、血甘油三酯、血胰岛素、肝糖原含量(P<0.05),倍他福林也可增加胰岛素抵抗大鼠肝脏GLUT-4蛋白表达(P<0.05)。实验结论:(1)HepG2细胞中加入5×10-7M的胰岛素,孵育16h,可以使HepG2细胞对胰岛素产生抵抗。倍他福林可以增加胰岛素抵抗细胞的葡萄糖消耗量,具有改善胰岛素抵抗的作用。(2)地塞米松(1mg/kg,隔日肌注)3周可以诱导大鼠产生胰岛素抵抗。倍他福林通过增加GLUT-4的表达,从而发挥抗糖尿病的作用。